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常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 脑心肌炎病毒(EMCV)核酸检测试剂盒品牌 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
() 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=0-2g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=0-6g)水平。能从00万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
氧杂环丁-3-醇 7748-36-9 25g Sephadex G-25 Medium 室温保存
乙钴 7-48-7 25g Sephadex G-50 Medium 室温保存
乙 7335-65- 25g Sephadex G-75 Medium 室温保存
乙烯基硼频哪醇酯 75927-49-0 25g Sephadex LH-20 室温保存
乙烯基三氯硅烷 75-94-5 00mL Sepharose 2B 4-8℃保存
2-乙烯氧基乙醇 764-48-7 00mL Sepharose 4B 4-8℃保存
异丙基丙二二乙酯 759-36-4 00mL Sepharose CL-2B 4-8℃保存
银 7440-22-4 00mL Sepharose CL-4B 4-8℃保存
扎西他滨 748-89-2 00mL Sepharose CL-6B 4-8℃保存
,5-二羟基萘 83-56-7 0g L-Serine 室温干燥保存
4-苄氧基苄 836-42-0 0mg Shikimic Acid 室温干燥保存
维生素 B2 83-88-5 kg Silica Gel 室温干燥保存
N-Boc-3-氨基丙基溴 83948-53-2 25g Silver Nitrate 室温干燥避光保存
3-溴-2-氟苯 84048-82-5 g Sinapic Acid 室温干燥保存
异丁基硼 840-40-7 5g Sirius Rosa BB 室温保存
TOXO IgG 弓形虫抗体 IgG(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
TOXO IgM 弓形虫抗体 IgM(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:50mg
TOXO IgM 弓形虫抗体 IgM(捕获法一步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
TOXO IgM 弓形虫抗体 IgM(捕获法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:50mg
HSV- I IgG 单纯疱疹Ⅰ型病毒 IgG(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
HSV- I IgM 单纯疱疹Ⅰ型病毒 IgM(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
HSV- I IgM 单纯疱疹Ⅰ型病毒 IgM(捕获法一步法) 进口/国产常温,避光 规格:50mg
HSV- I IgM 单纯疱疹Ⅰ型病毒 IgM(捕获法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:50mg
HSV- II IgG 单纯疱疹Ⅱ型病毒 IgG(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
HSV- II IgM 单纯疱疹Ⅱ型病毒 IgM(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
HSV- II IgM 单纯疱疹Ⅱ型病毒 IgM (捕获法,一步法) 进口/国产常温,避光 规格:50mg
HSV- II IgM 单纯疱疹Ⅱ型病毒 IgM (捕获法,二步法) 进口/国产常温,避光 规格:200mg
Anti-Ins 胰岛素抗体(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:50mg
Anti-GAD 谷氨脱羧酶抗体(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:00mg
Ins 胰岛素(间接法二步法) 进口/国产常温,避光 规格:200mg
特点:
. 脑心肌炎病毒(EMCV)核酸检测试剂盒品牌即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品5 μL 与用户自备的模板,引物和水共5 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取0 μL 电泳检查扩增结果。