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常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒品牌 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
() 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=0-2g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=0-6g)水平。能从00万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
苯硼 瓶 H97 低温运输和保存
α-氨基乙苯 瓶 H9c2(2-) 低温运输和保存
叔丁基三氯乙酰亚胺酯 瓶 HaCaT 低温运输和保存
-N-Boc-4-氧代-3-哌啶羧乙酯 瓶 HA 低温运输和保存
2-啶甲 瓶 HBL-00 低温运输和保存
焦磷四苄酯 瓶 HBZY- 低温运输和保存
3,5-二羟基甲 瓶 HCC937 低温运输和保存
4-(4-啶基)苯甲 瓶 HCC38 低温运输和保存
代钠 瓶 HCC827 低温运输和保存
亚锡,无水 瓶 HCC94[HCC9422] 低温运输和保存
氨基铵 瓶 HCCC-980 低温运输和保存
3-溴-4-氟苯甲 瓶 HCCLM3 低温运输和保存
3-羟基甲乙酯 瓶 Hce-8693 低温运输和保存
钼 瓶 HCT-6 低温运输和保存
代铵 瓶 HCT-5 低温运输和保存
sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) 小鼠可溶性CD30 进口/国产常温,避光 规格:50mg
TRAP-5b (Rabbit) 兔酒石磷酶TRAP-5b ELISA试剂盒 进口/国产常温,避光 规格:00mg
sMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2) 小鼠可溶性肌球蛋白重链 进口/国产常温,避光 规格:00mg
MT 大鼠金属蛋白 进口/国产常温,避光 规格:00mg
sCD40L (Rabbit differentiation 40 ligand) 兔子可溶性CD40配体 进口/国产常温,避光 规格:00mg
LCA/CD45(leukocyte common antigen) 人白细胞共同抗原 进口/国产常温,避光 规格:00mg
MHC I /RLA I (Rabbit major histocompatibility complex I ) 兔主要组织相容性复合体Ⅰ类 进口/国产常温,避光 规格:00mg
sMHC-(Mouse soluble myosin heavy chain 2) 小鼠可溶性肌球蛋白重链 进口/国产常温,避光 规格:50mg
c 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T 进口/国产常温,避光 规格:50mg
CD4(cluster Of differentiation) 人CD4分子 进口/国产常温,避光 规格:00mg
BLAP (Rabbit) 兔骨碱性磷酶 ELISA 试剂盒 进口/国产常温,避光 规格:00mg
AChE 大鼠乙酰酯酶 进口/国产常温,避光 规格:00mg
P-cad(Placenta Cadherin) 人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白 进口/国产常温,避光 规格:20mg
MUC5AC(Mouse Mucin-5 subtype AC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC 进口/国产常温,避光 规格:00mg
BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein) 兔骨钙素 ELISA试剂盒 进口/国产常温,避光 规格:00mg
特点:
. 新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒品牌即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品5 μL 与用户自备的模板,引物和水共5 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取0 μL 电泳检查扩增结果。