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人白细胞介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒操作步骤

时间:2014-01-16      阅读:414

人白细胞介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒
https://www.hbzhan.com/st99968/erlist_369848.html操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样
:在酶标包被板上设标准品孔10 孔,在*、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第
二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液
50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉,再各取50μl 分别加到第
五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、
第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释
液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十
孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。(稀释后各孔
加样量都为50μl,浓度分别为36ng/L,24ng/L ,12 ng/L,6ng/L,3 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl
(样品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃
动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30(48T 的20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T 的20 倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

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