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高压匀浆机:如何使细胞破碎?

技术文章2014/11/18 10:55:55
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导读:高压匀浆机是目前比较常用的细胞破碎设备,高压均质机与其它均质设备相比,具有占地面积小、效率高、能量大、反应时间快、运转费用低。本文将从破碎细胞原理介绍,阐述高压匀浆过程中的影响因素。

       高压匀浆法是大规模破碎细胞的常用方法,作用机理是液体剪切作用,利用高压使细胞悬浮液通过针形阀,由于突然减压和高速冲击撞击环使细胞破碎,细胞悬浮液自高压室针形阀喷出时,每秒速度高达几百米,高速喷出的浆液又射到静止的撞击环上,被迫改变方向从出口管流出。细胞在这一系列高速运动过程中经历了剪切、碰撞及由高压到常压的变化,从而造成细胞破碎。

破碎属于一级反应速度过程,被破碎的细胞分率符合如下公式:
ln[1/(1-R)]=KNPɑ
式中R—破碎率,为N次循环后,蛋白质的释放量Rn与zui大释放量Rm之比;
K-与温度有关的速度常数;
N-悬浮液通过匀浆器的次数;
P-操作压力,MPa;
ɑ-与微生物种类有关的常数。

       高压匀浆机细胞破碎影响因素有:匀浆操作压力对细胞破碎过程的影响、匀浆次数对细胞破碎过程的影响、菌体浓度对细胞破碎过程的影响、悬浮体系对细胞破碎过程的影响。

       影响高压匀浆破碎的因素主要有压力、温度和通过匀浆器阀的次数,由分析可知,操作压力对细胞破碎的影响要比匀浆次数的影响大得多。从提高破碎效率的角度应选择尽可能高的压力;而从降低能耗及延长设备寿命的角度应避免很高的压力,因此,工业生产中常采用的压力为55-70Mpa。

       高压匀浆法操作参数少,且易于确定;且样品损失量少,在间歇处理少量样品方面效果好,在实验室和工业生产中都已得到应用,适用于酵母和大多数细胞的破碎。对于易造成堵塞的团状或丝状真菌以及一些易损伤匀浆阀,质地坚硬的亚细胞器一般不适用。

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