Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒
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Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒

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参考价:¥3203600/盒

Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒

型号
参数
货号:CS-C6016 货期:1~3天 规格:20次|50次 英文名称:Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 用途:仅供科研研究实验
上海莼试生物技术有限公司

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详细信息

细胞生物学研究有以下几个方面:

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:

①细胞核、染色体以及基因表达的研究;

②生物膜与细胞器的研究;

③细胞骨架体系的研究;

④细胞增殖及其调控;

⑤细胞分化及其调控;

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);

⑦细胞的起源与进化;

⑧细胞工程.

细胞生物学研究的常用技术有哪些:

1.显微技术:包括显微观察,显微操作.

2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。

Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒试剂盒组份:

Annexin V-FITC——————100μl

Annexin V-FITC结合液———12ml

碘化丙啶染色液——————220μl

Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白,参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。

Annexin V选择性结合磷脂酰丝an酸(phosphatidylserine,简称PS)。磷脂酰丝an酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝an酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷脂酰丝an酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷脂酰丝an酸结合后可以阻断磷脂酰丝an酸的促凝血和促炎症反应活性。

用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝an酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。

本试剂盒还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,Annexin V-FITC可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝an酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。

本试剂盒的流式检测效果参考图1和图2,荧光显微镜检测效果参考图3。

1.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测细胞凋亡的效果图。Jurkat细胞未经处理(A)或用10μM(Camptothecin)作用4小时(B)后,用本试剂盒染色,然后用流式细胞仪进行细胞的散射和荧光检测。从图中可以看出,经过凋亡诱导剂处理后的细胞,其Annexin V-FITC染色阳性并且PI染色阴性的细胞,即凋亡细胞,明显增加(B图的右下象限),Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞,即坏死细胞,也有所增加(B图的右上象限)。图中Annexin V-FITC染色阴性PI染色阳性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B图的左上象限)出现的细胞点是许可范围内的检测误差。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

2.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测效果验证图。Jurkat细胞用10μM(Camptothecin)作用4小时后,未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出,未经染色的是双阴性细胞(A),仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞,仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞,Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞和双阳性的坏死细胞。出现的非预期的细胞点在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

储存条件:4℃避光,有效期6个月。

产品名称

Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒

货号

CS-C6016

英文名称

Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit

规格

20次|50次

本试剂盒是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝an酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。一个包装的本试剂盒共可以检测20个细胞样品。

Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 

注意事项:

1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。

2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。

3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法,实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
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