实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：

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细胞名称  前列腺癌细胞；DU145[DU145；DU-145]
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: DU145是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到激素敏感性，酸性磷酸酶阳性，单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:4~1:6传代；每周2~3次。

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法（-）
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
脑瘤细胞；SF767形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Bovine Plasmin ELISA Kit

皮肤黑色素瘤细胞；SK-MEL-1形态特性: 球形生长特性: 悬浮生长Human Cathepsin L ELISA KIT

兔主动脉平滑肌细胞；SMC形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human BMP-2 ELISA KIT

小鼠成纤维细胞；φ2形态特性: 成纤维细胞样生长特性: 贴壁生长Rat GM-CSF ELISA KIT

小鼠骨髓瘤细胞；Sp2/0-Ag14[SP20]形态特性: 淋巴母细胞样；圆形生长特性: 悬浮生长Human IL-1R4 ELISA KIT

肾上腺皮质癌细胞；SW-13形态特性: 上皮样；多角生长特性: 贴壁生长Human IL-12 ELISA KIT

结直肠癌细胞；T84形态特性: 上皮样；多角生长特性: 贴壁生长Human LOX-1 ELISA KIT

神经胶质细胞瘤细胞；U251形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human IL-1 sRII ELISA KIT

急性单核细胞白血病细胞；THP-1形态特性: 单核细胞生长特性: 悬浮生长Human RNase A ELISA KIT

非洲绿猴肾细胞；VERO形态特性: 上皮样细胞生长特性: 贴壁生长Human Complement factor H ELISA KIT

组织细胞淋巴瘤细胞；U937[U-937]形态特性: 单核细胞生长特性: 悬浮生长Mouse bFGF ELISA KIT

小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)；AtT-20形态特性: 小圆形细胞生长特性: 贴壁生长Human Albumin ELISA KIT

小鼠小胶质细胞；BV2形态特性: 多形型生长特性: 半贴壁生长Human Thrombopoietin ELISA KIT

小鼠骨髓瘤细胞；Fox-NY形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Rat IgG1 ELISA KIT

胃腺癌细胞；BGC-823形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Mouse Leptin ELISA KIT

兔主动脉平滑肌细胞；CCC-SMC-1形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human α-fetoprotein ELISA KIT
前列腺癌细胞；DU145[DU145；DU-145]小鼠肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒3-DPGELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒3-βDglucosidaseELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒3-βDglucosidaseELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒3-βDglucosidaseELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒3-βDglucosidaseELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒3-βDglucosidaseELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA试剂盒5-AGELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒5-HIAAELISAKit产品规格:48T/96T。