公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：

细胞名称  SV40T转化的胚肾细胞；293T
形态特性   上皮样　
生长特性  贴壁生长　
特征特性   表达SV40大T抗原，可用于转染和作为包装细胞；用于瞬时转染时可高表达AP融合蛋白。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　
传代方法   1:4~8传代；26~36小时1次
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS　
支原体检测  培养法（-）　

冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

Anti-Apo-E    载脂蛋白E抗体  0.1ml
Anti-APP695/770   淀粉样肽前体蛋白抗体  0.1ml
Anti-AQP-2   水通道蛋白-2抗体  0.1ml
Anti-AQP-3   水通道蛋白-3抗体  0.1ml
Anti-AQP4   水通道蛋白-4抗体  0.1ml
Anti-AR   雄激素受体抗体  0.1ml
Anti-ARC    ARC抗体  0.2ml
Anti-ARF6    ADP核糖基化因子6抗体  0.2ml
Anti-Aromatase P450   芳香化酶/细胞色素P450/P450抗体  0.1ml
anti-ARIP2a   激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗体  0.1ml
anti-β-arrestin 1/2   β-抑制蛋白1/2抗体  0.1ml
anti-ARIP2B   激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体  0.2ml
Anti-ART   胶质细胞系源性神经营养因子GDNF的一种抗体  0.1ml
Anti-ARα1   α1肾上腺素能受体抗体  0.1ml
Anti-ASCL1/MASH1    神经母细胞特异性转移因子抗体  0.1ml
anti-ASPP1   p53凋亡刺激蛋白1抗体  0.1ml
anti-ASPP2   P53凋亡刺激蛋白2  0.1ml
Anti-AT/AGT   血管紧张素原抗体  0.1ml
Anti-AT1R   血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体  0.2ml
Anti-ATF1    活化复制因子1抗体  0.1ml
Anti-ATF2    活化复制因子2抗体  0.2ml
Anti-ATF3    活化转录因子3抗体  0.2ml
Anti-B7-H1/PDL1/CD274   程序性死亡配体1抗体  0.1ml
Anti-B7-H4    B7H4抗体  0.2ml
Anti-BACE/ASP2    β分泌酶抗体  0.1ml
Anti-Bad    相关死亡促进因子Bad抗体  0.1ml
anti-Bak   Bcl-2同源拮抗剂Bak抗体  0.1ml
Anti-BADH2    BADH2抗体  0.1ml

人(TP-5)elisa试剂盒 Human Thymopentin, TP-5 Elisa Kit 96T/48T
人(Thymosin)elisa试剂盒 Human Thymosin Elisa Kit 96T/48T
人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1elisa试剂盒  Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 Elisa Kit 96T/48T
人甲状旁腺激素样蛋白(PLP)elisa试剂盒 Human parathyroid hormone-like protein, PLP Elisa Kit 96T/48T
人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)elisa试剂盒 Human visfatin Elisa Kit  96T/48T
人apelin 12(AP12)ELISA Ki Human apelin 12, AP12 Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)elisa试剂盒 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide, GIP Elisa Kit 96T/48T
人胰岛素原(PI)elisa试剂盒 Human Proinsulin, PI Elisa Kit 96T/48T
人胰岛素受体β(ISR-β)elisa试剂盒 Human Insulin Receptor β, ISR-β Elisa Kit 96T/48T
人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)elisa试剂盒 Human Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa Kit 96T/48T
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)elisa试剂盒 Human ghcagons-like pepfide 1, GLP-1 Elisa Kit 96T/48T
人甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)elisa试剂盒 human thyroid stimulating immunoglobulin, TSI Elisa Kit 96T/48T
人甲状旁腺激素(PTH)elisa试剂盒 human Parathyroid hormone, PTH Elisa Kit 96T/48T
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa试剂盒 human Prostaglandin D2-methoxime, PGD2-MOX Elisa Kit 96T/48T
人高敏甲状腺素(u-T4)elisa试剂盒 human Ultrasensitivity Thyroxine, u-T4 Elisa Kit 96T/48T
SV40T转化的胚肾细胞；293T人高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)elisa试剂盒 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone, U-TSH Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺(DA)elisa试剂盒 human dopamine, DA Elisa Kit 96T/48T
人(AZT)elisa试剂盒 human Azidothymidine, AZT Elisa Kit 96T/48T
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。