Brdu免疫荧光染色实验

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Brdu免疫荧光染色实验

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伊莱博生物科技(上海)有限公司(简称,伊莱博生物),总部位于上海市长江软件园,2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,是一家以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务的创新型高科技企业。主要致力于为科研人员及机构提供专业的技术团队和实验平台,建立包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学和动物实验等学科的研究服务体系。

伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。


为了响应大力发展基础研究的号召,推动生命科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,提供培训服务。通过实验理论培训和实践相结合,充分了解科学研究和实验操作的全过程,培训规范的实验操作、分析问题和解决问题的能力,分层次培养科研人才,为其今后的科研工作奠定坚实的基础。


因为专业,所以值得信赖;因为专注,所以高速发展;坚持“诚信创新,互利共赢”的原则;朝着“解决科研问题”这一目标,伊莱博人将通过自身的努力,与一线科研人员共同推动生命科学的快速发展!



详细信息

Brdu免疫荧光染色实验


1. 技术原理

Brdu是一种胸腺嘧啶核苷的类似物,其化学结构与胸腺嘧啶相似,但其中的氢原子被溴原子取代。当细胞处于增殖状态时,Brdu可以被细胞摄取并整合到新合成的DNA链中,从而替代正常的胸腺嘧啶。由于Brdu的存在,这些新合成的DNA链在后续的免疫荧光染色中可以被特异性地识别。

2. 实验步骤

Brdu免疫荧光染色实验的基本步骤通常包括:

  1. 细胞培养与Brdu处理:将目标细胞培养在适当的条件下,并在细胞增殖期加入适量的BrduBrdu的浓度和处理时间需要根据实验的具体需求进行调整。

  2. 细胞固定:使用适当的固定剂(如多聚甲醛)固定细胞,以保持细胞的形态和结构。

  3. DNA变性:为了暴露与Brdu结合的DNA区域,通常需要使用酸(如盐酸)对细胞进行变性处理。这一步是使Brdu暴露出来的关键步骤。

  4. 中和:使用适当的缓冲液(如硼酸钠)中和残留的酸,以避免对后续步骤的干扰。

  5. 抗体孵育:将特异性针对Brdu的抗体加入细胞样本中,使其与整合了BrduDNA结合。这一步骤通常需要在适当的温度和湿度条件下进行一定时间的孵育。

  6. 荧光二抗标记:使用带有荧光标记的二抗与一抗结合,形成荧光信号。荧光标记的二抗可以根据实验需求选择不同的荧光颜色。

  7. 观察与分析:使用荧光显微镜观察染色后的细胞样本,通过荧光信号的强度和分布来分析细胞的增殖情况。

3. 应用领域

Brdu免疫荧光染色技术广泛应用于生物医学研究的多个领域,包括:

  • 肿瘤学:研究肿瘤细胞的增殖情况、细胞周期和细胞凋亡等。

  • 发育生物学:研究器官、组织和细胞的发育过程。

  • 神经科学:研究神经元的增殖和分化。

  • 再生医学:评估干细胞和祖细胞的增殖潜力。

4. 优点与注意事项

优点

  • 高灵敏度:能够检测到单个增殖细胞中的Brdu整合。

  • 高特异性:特异性抗体确保了检测结果的准确性。

  • 广泛应用:适用于多种细胞类型和实验条件。

注意事项

  • 实验过程中需要严格控制各步骤的条件和时间,以确保结果的准确性。

  • Brdu是光敏性物质,在操作过程中需要避光处理。

  • 抗体和二抗的选择需要根据实验的具体需求进行优化。

 







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