成年小鼠关节软骨细胞原代培养
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伊莱博生物科技(上海)有限公司(简称,伊莱博生物),总部位于上海市长江软件园,2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,是一家以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务的创新型高科技企业。主要致力于为科研人员及机构提供专业的技术团队和实验平台,建立包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学和动物实验等学科的研究服务体系。
伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。
为了响应大力发展基础研究的号召,推动生命科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,提供培训服务。通过实验理论培训和实践相结合,充分了解科学研究和实验操作的全过程,培训规范的实验操作、分析问题和解决问题的能力,分层次培养科研人才,为其今后的科研工作奠定坚实的基础。
因为专业,所以值得信赖;因为专注,所以高速发展;坚持“诚信创新,互利共赢”的原则;朝着“解决科研问题”这一目标,伊莱博人将通过自身的努力,与一线科研人员共同推动生命科学的快速发展!
1. C57小鼠,8-10周,通过颈椎脱位处死,浸入75%乙醇浸泡5分钟,转移到通风柜中的解剖盘中。
2. 使用ykj和nz,使髋关节脱臼,保持股骨头完整。
3. 用zxq去除每个股骨头的软骨帽,将组织放入含2%双抗的PBS中。
4. 用冰冷的含2%双抗的PBS清洗2-3遍,将关节软骨小心移到2ml离心管中。
5. 用ykj将软骨帽剪成约1mm3的碎片,加入3ml预热的Collagenase D(1.5mg/ml)。
6. 放入37℃、80rpm的摇床中进行第一次消化,时间2h 。
7. 第一次消化结束后,加入含血清的培养基终止消化,40um的细胞筛过滤后,离心1500rpm,2min。
8. 沉淀用DMEMwq培养基重悬,计数,种植在24孔板中。
9. 在未消化的组织中加入3ml预热的Collagenase D,放入37℃、80rpm的摇床中进行第二次消化,时间2h,然后收集细胞。