分子克隆与质粒载体构建服务
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伊莱博生物科技（上海）有限公司（简称，伊莱博生物），总部位于上海市长江软件园，2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心，是一家以生命科学研究为基础，专注于研究成果转化及技术服务的创新型高科技企业。主要致力于为科研人员及机构提供专业的技术团队和实验平台，建立包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学和动物实验等学科的研究服务体系。
伊莱博生物拥有丰富的研究经验，具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米，拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米，可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构，能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。
为了响应大力发展基础研究的号召，推动生命科学领域的进步，伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势，提供培训服务。通过实验理论培训和实践相结合，充分了解科学研究和实验操作的全过程，培训规范的实验操作、分析问题和解决问题的能力，分层次培养科研人才，为其今后的科研工作奠定坚实的基础。
因为专业，所以值得信赖；因为专注，所以高速发展；坚持“诚信创新，互利共赢”的原则；朝着“解决科研问题”这一目标，伊莱博人将通过自身的努力，与一线科研人员共同推动生命科学的快速发展!
详细信息
分子克隆与质粒载体构建服务：
一、分子克隆与质粒载体构建服务实验原理
外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。DNA连接酶有两种：T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能，而且T4噬菌体DNA连接酶还有—种大肠杆菌连接酶没有的特性，即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接效率低，一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。
T4噬菌体DNA连接酶催化DNA连接反应分为3步：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶—AMP复合物；然后，酶—AMP复合物再结合到具有5’磷酸基和3’羟基切口的DNA上，使DNA腺苷化；后产生一个新的磷酸二酯键，把切口封起来。
DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法，为了防止载体本身的自连，可以通过(牛小肠碱性磷酸酶)CIP处理克服。
连接反应的温度在37℃时有利于连接酶的活性.但是在这个温度下，粘性末端的氢键结合是不稳定的。因此人们找到了一个折中温度，即12-16℃，连接12-16h(过夜)，这样既可大限度地发挥连接酶的活性，又兼顾到短暂配对结构的稳定。
二、实验流程
目的DNA的扩增和纯化；连接反应；电泳检测连接产物。
三、客户提供
样本DNA，基因序列，试剂盒。
四、公司提供
构建好的载体，电泳胶图，测序结果。
实验周期：大约1-2月。
