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银染法染色
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伊莱博生物科技(上海)有限公司(简称,伊莱博生物),总部位于上海市长江软件园,2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,是一家以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务的创新型高科技企业。主要致力于为科研人员及机构提供专业的技术团队和实验平台,建立包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学和动物实验等学科的研究服务体系。
伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。
为了响应大力发展基础研究的号召,推动生命科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,提供培训服务。通过实验理论培训和实践相结合,充分了解科学研究和实验操作的全过程,培训规范的实验操作、分析问题和解决问题的能力,分层次培养科研人才,为其今后的科研工作奠定坚实的基础。
因为专业,所以值得信赖;因为专注,所以高速发展;坚持“诚信创新,互利共赢”的原则;朝着“解决科研问题”这一目标,伊莱博人将通过自身的努力,与一线科研人员共同推动生命科学的快速发展!
银染法染色
一、定义与原理
定义:银染是一种通过化学反应使银离子在蛋白质上沉积形成可见的银颗粒,从而实现对蛋白质进行染色的技术。
原理:在碱性条件下,甲醛等还原剂可以将蛋白带上的xiaosuanyin(银离子)还原成金属银,这些金属银颗粒沉积在蛋白质上,形成可见的染色效果。
二、试剂与材料
银染过程中常用的试剂包括:
乙醇
冰醋酸(纯乙酸)
xiaosuanyin
jiaquanrongye
碳酸钠
liudailiusuanna
乙酸钠等
这些试剂在银染的不同步骤中发挥着不同的作用,如固定、致敏、染色、显色和终止等。
三、实验步骤
银染法染色实验步骤通常包括以下几个阶段:
1. 固定:使用含有乙醇和冰醋酸的固定液处理凝胶,以稳定蛋白质并去除凝胶中的杂质。
2. 致敏:通过加入乙酸钠和liudailiusuanna等试剂,使凝胶表面变得更容易吸附银离子。
3. 洗涤:使用纯水洗涤凝胶,去除多余的试剂。
4. 染色:将凝胶浸泡在含有xiaosuanyin和甲醛的染色液中,使银离子与蛋白质结合。
5. 显色:在碱性条件下,使用含有碳酸钠和甲醛的显色液使银离子还原成金属银,形成可见的染色效果。
6. 终止:使用终止液(如EDTA或ganansuan)停止显色反应,并固定染色结果。
银染法实验具体步骤如下:
1. 固定:将凝胶放入约100ml固定液中,室温摇动20分钟或40分钟以上甚至过夜。
2. 洗涤:弃去固定液,加入100ml 30%乙醇或100ml 10%甲醇,室温摇动10分钟。
3. 增敏:加入100ml银染增敏液(1X)或100ml银溶液(1X),室温摇动2分钟。
4. 洗涤:弃去增敏液,加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水,室温摇动10分钟。
5. 显色:加入100ml银溶液(1X)或显色液,室温摇动10分钟。
6. 洗涤:弃去显色液,加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水,室温摇动1-1.5分钟。
7. 显影:根据显色结果,使用显影液进行显影,直至看到目的蛋白带