尿素酶 详细资料：

概述　
　尿素酶是一种人和动物胃肠道及泌尿道细菌感染中常见的酶，它既是人和动物中某些致病菌的致病因子之一，又是某些氮源性*物转化所必须具备的酶之一. 它是人类*获得晶体并发现含有Ni离子的金属酶〔7〕。 　　又名脲酶，详见百科“脲酶”词条。编辑本段的理化性状　　Hp除有的一般理化性状外，还有其*性. Hp分子量为550KDa左右，直径13nm，等电点5.99±0.03，zui适温度45℃，zui适pH 8.2. Km值0.3mmol/L±0.1mmol/L，在饱和条件下纯化的活性为每毫克蛋白质每分钟水解1100μmol±?200μmol尿素，较低Km值有助于Hp的在尿素浓度较低的人胃环境中始终处于饱和状态而发挥zui大的功能. Hp单体由A，B两个亚单位组成，呈六聚体，A，B两个亚单体的Mr分别为30000和64000左右，其比例为1∶1，而其他菌属所含则有三个亚单位组成. Hp的量很大，占全菌蛋白的5%～10%. 一般为胞质蛋白，而Hp具有大量高活性的胞外，Hp产生的活性相当于奇异变形杆菌的2倍，阳性肠道菌的7倍，故活性的测定可以作为Hp的快速诊断方法。编辑本段大豆粕中的测定：测定方法1
　　方法名称：尿素— *红法（美国大豆协会） 　　1 原理 　　活性是大豆饼粕类加工正确与否的标志，它的活性的高低与大豆饼粕加工（热）程度有直接关系，此方法是在指示剂*磺存在的条件下，按尿素转变成氨的方法定性测定豆粕中的活性。 　　2 试剂 　　（1）0.1mol/L硫酸（将6ml浓硫酸缓缓注入1000ml水中） 　　（2）0.2mol/L氢氧化钠：取0.8g氢氧化钠加蒸馏水，溶解成100ml 　　（3）尿素— *红（别名：酚磺肽、酚红）试剂：将 1.2g*红溶于30mL0.2mol/L氢氧化钠溶液中，用蒸馏水稀释至300mL；加入90g尿素并溶解之，用蒸馏水稀释至 2L；加 70mL0.1mol/L硫酸；稀释至3L。 　　注意：配好的溶液应具有明亮的琥珀色，若溶液转变成桔红色时，应滴加0.1mol/L硫酸，调至呈琥珀色，试剂在试验前配制，现配现用。尿素—*红试剂有效期仅90天。 　　3．测定方法 　　（1）取粉碎好的豆粕，均匀地平铺于培养皿中（注意铺薄薄一层）。 　　（2）用滴管吸取尿素— *红试剂，小自心滴在被测定的样品中，将培养皿中豆粕全部浸湿。 　　（3）放置5分钟后观察结果： 　　①没有任何红点出现，再放置25分钟，若还无红点出现，说明没有活性，是豆粕加工过熟了。 　　②有少数红点，为少量活性，豆粕可用。 　　③豆粕表面有25%的红点覆盖，有少量活性，可用。 　　④豆粕表面出现50%的红点覆盖，活性大，应慎用。 　　⑤豆粕表面的 75%一*为红点覆盖，活性很高，说明豆粕过生，无法使用。
测定方法2
　　名称：酚红指示剂 　　1、原理 　　酚红指示剂在PH6.4—8.2时由黄变红，大豆制品中所含的，在室温下可将尿素水解，产生氨，释放的氨可使酚红指示剂变红，根据变红时间长短来判断活性大小。 　　2、仪器和试剂 　　（1） 粉碎装置：粉碎时应不产生强烈发热（如研体球磨机） 　　（2） 天平：感量0.01g 　　（3） 试管：直径1.8cm，长15cm 　　（4） 尿素：分析纯 　　（5） 酚红：分析纯、0.1%乙醇（20%）溶液 　　3、测定步骤 　　将试样研细，称取0.02g试样,称准至0.01g重，转入试管中，加入0.02g结晶尿素及两滴酚红指示剂，加20—30mL蒸馏水，摇动10s钟。观察溶液颜色，并记下呈粉红色的时间。 　　4、活性的测定结果表示： 　　（1）1分钟内呈粉红色为活性很强。 　　（2）1—5分钟内呈粉红色为活性强。 　　（3）5—15 分钟内呈粉红色为有点活性。 　　（4）15—30分钟内呈粉红色为没有活性。 　　通常10分钟以上不显粉红色或红色的大豆制品，其活性即可认为合格。

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