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50管/48样 过氧化氢酶(CAT)测试盒(紫外吸收法)_分光法
- 型号
- 50管/48样
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上海纪宁实业有限公司位于中国城市——中华人民共和国直辖市之一的上海，已发展成生产、销售为一体的创新性企业。公司专注于生物、生化领域产品销售，主要经营的有ELISA试剂盒、生化试剂、抗体、标准品、对照品、细胞、血清、培养基等生化产品。
公司主要产品分类：
ELISA试剂盒：人ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、仓鼠ELISA试剂盒、裸鼠ELISA试剂盒、猪ELISA试剂盒、鸡ELISA试剂盒、鸭ELISA试剂盒、羊ELISA试剂盒、马ELISA试剂盒、植物ELISA试剂盒、昆虫ELISA试剂盒等
生化试剂：氨基酸类、酶类、蛋白质类、色素类、表面活性剂类、缓冲剂类、抗生素类、植物激素及核酸类、维生素类、碳水化合物类、培养基类等试剂产品
标准品、对照品：西药标准品、中药化学标准品、抗生素标准品、生化标准品、中药工作对照品等标准品及对照品
详细信息
过氧化氢酶(CAT)测试盒(紫外吸收法)_分光法
测定方法：分光光度法
产品规格：50管/48样
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
过氧化氢酶(CAT)测试盒(紫外吸收法)_分光法
测定原理：
H2O2在240nm下有特征吸收峰，CAT能够分解H2O2，使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
工作液：60mL×1瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至240nm处，蒸馏水调零。
2、测定前将CAT检测工作液37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min。
3、在1mL石英比色皿中加入35μL样本和1mL工作液，混匀，室温下立即测定240nm下的初始吸光值A1和1min后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2
注意事项：
出现负值怎么办？
检查反应过程是否产生气泡，气泡多说明酶活性太高，气泡影响产生了负值，可以将样本用提取液稀释10倍后再检测。如果稀释样本或反应体系没有产生气泡仍然出现较小的负值，说明该样本测不到该酶活。
