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面议人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,NK-92MI细胞,NK92MI进口细胞基本特性
细胞数量:100万个细胞数
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
形态特性:淋巴母细胞样
生长特性:悬浮生长
特征特性:人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,NK-92MI细胞,NK92MI细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。NK-92MI是转染得到的源自NK-92的IL-2非依赖的NK细胞株,亲本细胞通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2
cDNA进行转化。 可能由于载体整合到基因组DNA中,转化是稳定的。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。
NK-92细胞有以下特征: CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD5。
培养条件:α-MEM:Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 马血清,
12.5%;优质胎牛血清,12.5%
传代方法:1:2。3天内可长满。
传代情况:
冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测:阴性
STR:
同工酶:
染色体:
使用权限:A类
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客户收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。
2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之*无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
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