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面议人子宫颈鳞状细胞癌细胞,SiHa进口细胞基本特性
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:
人子宫颈鳞状细胞癌细胞,SiHa细胞该细胞来源于一位日本病人的手术切除的肿瘤组织。电镜下可以看到细胞间典型的桥粒和细胞质中大量的张力丝。1975年发现有支原体污染,而后被去除。该细胞整合有HPV16基因组,每个细胞中有1~2个拷贝。
培养条件:MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)
10%FBS
传代方法:1:3~1:8传代,每周换液2~3次。
传代情况:C3
冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测:培养法(-)
STR:Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:11;D16S539:12;D18S51:14,15;D19S433:14.2;D21S11:29,31;D2S1338:24;D3S1358:17;D5S818:9;D7S820:10;D8S1179:13,16;FGA:21;TH01:6,9;TPOX:8;vWA:14,17;
染色体:
使用权限:A类
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客户收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。
2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之*无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
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