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面议荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞,U2OS-Luc teT-on进口细胞
形态特性:上皮样;多角形
生长特性:贴壁生长
特征特性:荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞,U2OS-Luc teT-on细胞. 1971年1月,表达荧光素酶,带四环素开关。
培养条件:DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)
10%Tet system 提供的胎牛血清;200 μg/ml G418
传代方法:1:2~1:4传代,每周2次换液。
传代情况:C3
冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测:培养法(-)
STR:Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:13;D16S539:11,12;D18S51:12,14;D19S433:15;D21S11:31;D2S1338:20,24;D3S1358:16,OL;D5S818:8,11;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:20;TH01:6,9.3;TPOX:11,12;vWA:14,18;
染色体:
使用权限:A类
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客户收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。
2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之*无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
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