花青素（Anthocyan）检测试剂盒说明书
时间：2021-06-02 阅读：1544
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上海信帆生物科技有限公司 -
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花青素(Anthocyan)检测试剂盒(微板法)
产品简介：
花青素(anthocyan,cyanidin)又称花色素（anthocyanidin），属黄烷衍生物，溶解于
细胞液中，是植物体内广泛分布的花色素之一，是花色素苷(anthocyains, anthocyanin) 水
解而得的有颜色的苷元。植物体内存在花青素、叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮、酚类等物质
与花、果实和叶片的颜色有关，而且与果实等样品衰老过程密切相关，对其加工性能、存储、
营养价值等都有重要影响。
植物花青素检测试剂盒(微板法)检测原理是花青素溶于有机溶剂，以有机溶剂
粗提花青素，花青素在酸性溶液中呈红色，颜色深浅与花青素含量呈正比，于 530nm 有
大吸收波，可利用酶标仪测定其吸光度，进而计算出花青素的含量，方法简单易行。因组织
中花青素种类不同，所需标准品亦不同，本产品不含标准品，因此只能检测花青素的相对含
量。如需检测样品中花青素的准确含量，请自备对应种类的花青素标准品。本试剂盒主要用
于植物组织或果实中花青素的提取以及定量检测花青素相对含量。该试盒仅用于科研领域，
不宜用于诊断或其他用途。
产品组成：
名称 100T Storage
Anthocyan Assay Buffer 2×500ml RT
使用说明书 1 份
自备材料：
1、实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
2、研钵或匀浆器
3、离心管、离心机
4、滤纸或纱布
5、96 孔板
6、酶标仪
操作步骤(仅供参考)：
1、花青素提取：
方法一：
①4℃预冷研钵或匀浆器，以及 Anthocyan Assay Buffer。
编号
名称
100T
Storage
Anthocyan Assay Buffer
2×500ml
RT
使用说明书
1 份②取植物组织，洗净，擦干，称取新鲜样品 0.25g，剪碎，置于研钵或匀浆器中。
③加入 2~3ml Anthocyan Assay Buffer，充分研磨或匀浆后转入 10ml 离心管，用
Anthocyan Assay Buffer 冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管，补加 Anthocyan Assay
Buffer 至 8ml。
④4℃避光静置 20min， 期间摇动 2~3 次，然后过滤至离心管，也可用离心机
8000r/min 离心 3min，滤液（上清液）即为花青素粗提液。
方法二：
将样品按上述比例加入提取液中，置于 32℃温箱浸提 4~8h(期间可摇动数次) ，或室
温下避光浸提 24h，离心取上清即为花青素粗提液。
2、加样及测定：取 96 孔板，用 Anthocyan Assay Buffer 做空白对照，取花青素提取液
（200~300ul）用酶标仪在 530nm 波长处读取吸光度值。如果花青素浓度过高，可以
减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测好能设置 2 平行孔，求平均值。
计算：
花青素单位定义：以 OD 值为 0.1 时的花青素浓度称为一个单位(U)。计算方法如下：
组织样品的花青素含量(U/g)=(A 测定-A 空白)/(0.1xW)
式中：A 测定=花青素提取液在 530nm 的 OD 值
A 空白=空白对照在 530nm 的 OD 值
W=样品鲜重(g)
亦可用自备的花青素标准品做梯度稀释(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)，用
Anthocyan Assay Buffer 做空白对照，绘制标准曲线，进而计算出样品中花青素的含量。
组织样品的花青素(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中：C=根据标准曲线求得的测定管花青素含量(mg/ml)
VT=花青素粗提液总体积(ml)=8
V1=加样时所用花青素粗提液的体积(ml)
W=样品鲜重(g)
液体样品的花青素(mg/ml)=C×N/V
式中：C=根据标准曲线求得的测定管花青素含量(mg/ml)
V=加样时所用花青素粗提液的体积(ml)
N=稀释倍数
注意事项：
1、 为了避免花青素见光发生变化，操作时应尽量避光，研磨或匀浆应尽量缩短时间。
2、 取样量、试剂用量应根据花青素含量适当调整。3、 Anthocyan Assay Buffer 应密闭保存，避免有效成分挥发。
4、 如果没有酶标仪，也可以使用分光光度计测定。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12 个月有效.