血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒

血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒

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2015-12-27 15:00:57
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产品简介

货号:WT6869 产品名称:血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒 上海蔚霆生物科技有限公司*提供ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、价格实惠,质量有保证,信誉*。凡购买目录本公司ELISA检测试剂盒可免费提供代测服务。索取各ELISA试剂盒产品说明书。如需订购,请点击左上角的进行咨询,我们会尽快跟您!

详细介绍

血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒规格:48T/96T

上海蔚霆生物科技有限公司*提供各种种属、各种系列Elisa试剂盒,价格实惠,质量有保证,信誉*。索取各ELISA试剂盒产品说明书。凡购买目录本公司ELISA检测试剂盒可免费提供代测服务。如需订购,请点击左上角的进行咨询,我们会尽快跟您!

血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒ELISA试剂盒说明

1.试剂盒保存:-20(较长时间不用时);2-8(频繁使用时)。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

Elisa试剂盒实验原理

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗LEP抗体的微孔中依次加入标本或标准品、*化的抗LEP抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的LEP呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒ELISA试剂盒组成及试剂配制

1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。

2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. *标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. *标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

Elisa试剂盒操作步骤

实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37反应120分钟。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加*标记抗体工作液 100μl(取1μl*标记抗体加99μl*标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37,60分钟。

3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同*标记抗体工作液) 100μl3760分钟。

5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl37避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒

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