夹心红细胞免疫试验检测与鉴定热不稳定肠毒素(LT)
时间:2011-05-14 阅读:286
此法由Germant等(1987)报道,其检测试剂为CTIgG致敏的绵羊红细胞,故反应结果可肉眼直观。方法是以兔抗CTIgG包被V形聚乙烯板,每孔1OOμL,37□,4h后移至4℃,18h弃去末结合的抗体,用含O.1%tween-2O的PBS(PBS-T)洗3次,晾干后;加入15Oul热灭活胎牛血清(5%),37℃作用儿,以封闭未结合键,弃封闭液,再以PBS-T洗涤3次,加入1OOml待检菌培养物离心上清的滤液(O.22μL),28℃湿盒内作用1h,洗涤后加入CT抗体致敏绵羊细胞(戊二醛法),室温下静置2-4h后,按常规血凝法判定标准观察反应结果。
经与ELISA和Ver。细胞二法作平行对比试验,结果基本一致。但本法简便经济,毋需细胞培养,尤其适用于大量标本的检测。