现场或牧区大群检疫布氏杆菌病的免疫学方法
时间:2011-05-25 阅读:783
1.虎红平板凝集试验(RBT)
虎红平板凝集试验是血清凝集试验(SAT)中较常用的一种方法。我国于1980年开始应用,目前应用广泛。其抗原为虎红染色抗原。将每份血清样品取25~30uL放在白搪瓷板、塑料板或WHO血凝反应板上,在每份血清滴的旁边加等量抗原,在zui后一滴抗原加上以后立即混合血清和抗原,使其形成直径约2cra的区域,室温下轻微摇晃4min,凡出现可见凝集反应者均判为阳性,反之判为阴性。
RBT试验敏感,然而,与其他血清学试验一样,由于S19疫苗免疫或假阳性反应(FPSR)而出现阳性结果。假阴性反应较少发生(主要是因为前带反应),对血清样品进行稀释或一定时间后重复检测可消除这种反应。RBT试验可以作为感染畜群的筛查实验,阳性反应应用合适的确证体系进行复查(包括其他试验检验和流行病学调查)。
2.缓冲布氏杆菌平板凝集试验(BPAT)
取血清80ul与30ul的抗原在玻板上标出的4cm×4cm的范围内混合均匀,接着将板倾斜旋转3次,以使二者均匀散开,然后将板置常温下(20~25℃)湿盒内孵育4min。再取出如前述旋转3次再孵育4min。取出玻板,边转边观察凝集情况。任何可见的凝集均判为阳性。与虎红平板凝集试验一样,此法也很敏感,尤其是对免疫过的动物。阳性样品需用验证实验进行复查。假阴性的出现通常是由于前带反应,通过对血清进行稀释或一定时间后复查可消除这种影响。
3.布氏杆菌病全榛纷词匝?
抗原由兽医生物药厂供应。受检乳样须为新鲜的全乳,采乳样时应将母畜的乳房用温水洗净、擦干,然后将乳液挤入洁净的器皿中,采集的乳样夏季时应于当日内检查,保存于2℃时,7天内可使用。取乳样lml,加于灭菌凝集试验管内,然后取充分振荡混合均匀的全乳环状抗原1滴(约50pL)加入乳样中充分混匀。置37-38℃水浴中60min,加温后取出试管勿使之振荡,立即进行判定。按乳脂和乳柱的颜色进行判定,脂肪较少或无脂肪的牛乳呈阳性反应时,菌体呈凝集现象下沉管底,判定时以乳柱的反应为准。