Alkaline Phosphatase Assay Kit 
碱性磷酸酶活性检测试剂盒（显色法）

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产品关键词：

Phosphatase, Alkaline碱性磷酸酶；ALP/AKP；对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）；偶氮偶联法；显色法（定量）；染色法（定性）；

基本介绍：
? 碱性磷酸酶（Phosphatase, Alkaline，ALP/AP/AKP/ALKP/ALPase，EC 3.1.3.1），是一种含两个相同亚基的二聚体，也是一种约含12%碳水化合物（6%己糖和6%其他中性糖）的糖蛋白，每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下，ALP可达到zui高酶活。碱性条件下，ALP能催化磷酸单酯水解，比如对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）、磷酸苯酯、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸等。

? 常见的碱性磷酸酶ALP包括肠道碱性磷酸酶（如小牛肠来源，calf intestinal）、胎盘碱性磷酸酶（placental alkaline phosphatase）、非组织特异性碱性磷酸酶（tissue-nonspecific isozyme, alkaline phosphatase）等。

? ALP常用来偶联抗体和其他蛋白，从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验，比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。

研究意义：

碱性磷酸酶（ALP）活性的变化与一系列生理和病理事件紧密关联，比如骨骼发育、骨骼相关疾病、妊shen相关疾病和炎症性肠病（inflammatory bowel diseases）等。正因如此，ALP被用作衡量生理特征或疾病的参照指标。另外，ALP活性检测在环境监测、食品质量控制等方面也呈现重要作用。

? 干细胞如诱导多潜能干细胞iPS，ALP活性很高，则ALP常被用作iPS诱导成功的标志；

? 分化的结肠癌细胞内ALP活性显著提高，则ALP常被当做结肠癌细胞分化程度的指标（定性/定量）；

? 血清中ALP水平提高，被称作高碱性磷酸酶血症，此症状被认为和恶性胆管阻塞、原发性胆管硬化、原发性硬化胆管炎、肝淋巴瘤和肝肉瘤等肝胆疾病密切相关；

? ALP是成骨细胞的副产物，血清中ALP活性升高和骨头发育密切关联；

? 血清ALP活性过低也与一些疾病相关；

? 儿童和孕妇血清内ALP活性较常人高一些；血清中ALP活性范围在20-140U/L。
 

检测原理（碱性磷酸酶活性）：

对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）是一种常用的碱性磷酸酶（ALP）显色底物，碱性条件下能被ALP催化生成对硝基酚（para-nitrophenol，p-nitrophenol），呈黄色产物，可在400-415nm检测到吸光度。产物黄色越深，代表ALP活性越高，反之则酶活性越低。则通过比色分析可定量检测ALP水平。

反应式如下：

检测对象：

细胞或组织裂解液或匀浆液、血清、血浆、尿液等样品内源性碱性磷酸酶活性。

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试剂盒组分：

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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 MP7501 ALP Assay Kit (Colorimetric) 碱性磷酸酶检测试剂盒（显色法）

MP7501 ALP Assay Kit (Colorimetric) 碱性磷酸酶检测试剂盒（显色法）