T2001-Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母转化试剂盒克隆与表-上海懋康生物科技有限公司手机版

详细介绍

Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™

Frozen-EZ酵母转化试剂盒

【温馨提示】：

见我司懋康生物整理的酵母双杂交检测（Yeast two-hybrid assay）产品专题。

基本描述

Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母转化试剂盒）是一款专门设计用于酵母转化和文库筛选的试剂盒，比目前商业或公开的文献方法更快捷和更有效。本试剂盒制备的酵母细胞可立即用于转化或冻存待用（≤ -70°C）。本试剂盒制备的细胞适用于环形和线性DNAs转化，同时也能用于其他真菌包括C. albicans，S. pombe和P. pastoris的转化。

产品亮点：

高转化效率：每µg质粒DNA（环形）可产生10⁵ - 10⁶个酵母转化子；
制备好的感受态细胞可冻存后待用；
快速简单步骤于10min内可制备酵母感受态细胞；
简单单一步骤，1h内完成转化；
适用菌株类型广（S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, Pichia pastoris）；
简单方法用于多质粒转化；

产品组分：本试剂盒可做120个常规转化或600个微量转化实验。试剂盒4℃一年有效。

组分	规格	保存
EZ1 Solution	60ml	0-4℃
EZ2 Solution	6ml	0-4℃
EZ3 Solution	60ml	0-4℃

操作流程【见下图】：

A，感受态细胞制备

30℃，于10ml YPD肉汤培养酵母菌直至中数量级（~5 x 10⁶-2 x10⁷cells/ml 或OD₆₀₀= 0.8-1.0）。以下步骤室温进行。

A1，500 x g离心细胞4min，吸掉上清液；

A2，加入10ml EZ1溶液清洗沉淀。重新离心沉淀细胞，吸掉上清液；

A3，加入1ml EZ2溶液重悬沉淀细胞。

此时获得的感受态细胞即可直接用于转化或冻存备用（≤ -70°C）。注意需缓慢冻存细胞，不可使用液氮瞬间冻存细胞。

B，转化

以下步骤适用于新鲜制备和冻存（室温融化）的酵母感受态细胞。

B1，取50µl感受态细胞与0.2-1µg DNA（体积少于5µl）混合；加入500µl EZ3溶液，*混合；

B2，30°C孵育45min，孵育过程中用手指轻弹或低速涡旋（如果适用于转化DNA）2-3次让其混匀；

B3，从上面转化混合液中取50-150µl到适当平板上，没有必要沉淀或清洗细胞。、

B4，30°C孵育平板2-4天使得转化子生长。

订购信息：Zymo Research原装正品，现货供应。咨询，，：。

货号	产品名称	规格	价格（元）
T2001	Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母转化试剂盒）	120 Rxns	咨询

T2001 Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ User Manual

引用文献：

Plasmids were transformed with high efficiency using the Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ in the construction of synthetic yeast promoters. Researchers showed that decreasing nucleosome affinity correlated with increasing promoter strength and expression levels higher than native species.

Curran KA, et. al. (2014) Design of synthetic yeast promoters via tuning of nucleosome architecture. Nat Commun. 5:4002.

The Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit was used to integrate various TEF1 promoter mutants upstream of a gene in Saccharomyces cerevisiae. Efficient transformation allowed comparison of gene activity and, therefore, determination of promoter strength.

Nevoigt, E., et al. (2006) Engineering of promoter replacement cassettes for fine-tuning of gene expression in Saccharomyces cerevisiae. Appl Environ Microb, 72(8): 5266-5273.

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母转化试剂盒克隆与表达分析

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