Human DiI-Ox-LDL (Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein)

人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白产品的背景知识，可见MKBio整理的技术文章：脂蛋白类型与作用机理。

想了解更多脂蛋白产品，可见MKBio整理的产品专题：脂蛋白产品专题。

想了解内皮祖细胞（EPC）鉴定的双标记方法，可见MKBio整理的产品专题：EPC双标记鉴定产品专题。

搜索关键词：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修饰Ox-LDL；乙酰化修饰Ac-LDL；LDL receptor LDL受体；Cholesterol 胆gu醇；Cholesteryl ester (CE) 胆gu醇酯 ；Triglyceride (TG) 甘油三酯；Cardiovascular diseases 心血管疾病；Atherosclerosis (AS) 动脉粥样硬化； 

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温馨提示：由于脂蛋白的保存周期比较短，约6周。本司一般都是接到订单后再生产，从而保证客户拿到最长效期的产品。所以，我们货期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，简称为LDL）是血液中五种常见脂蛋白之一，由极低密度脂蛋白（VLDL）通过脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其丧失部分甘油三酯转化而来。LDL是主要的胆gu醇和胆gu醇酯转运体，占血浆脂蛋白总量的一半以上。LDL通过受体介导的内吞作用被肝脏和其他组织吸收。LDL适用于心血管研究和脂质运输研究，也适用于LDL代谢及其与心血管疾病的关联性研究。还能用作细胞标志物和疾病标志物。

氧化的LDL（Oxidized LDL，Ox-LDL）是修饰LDL中的一种，还包括乙酰化LDL、以及丙二醛（MDA）、4-羟烯酸（4-HNE）直接结合的LDL，这些未经氧化修饰，仅仅是经一般化学修饰的LDL称为衍化LDL。两者都可被清道夫受体识别，诱导泡沫细胞的形成。但两者之间也有些差异，主要表现在：1）细胞生理功能方面，Ox-LDL可诱发细胞毒性作用，影响花生四烯酸代谢，抑制胆gu醇酯化作用等，但衍化LDL无上述效应；2）Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质，使LDL上的维生suE含量下降，而MDA-LDL无上述效应；3）Ox-LDL涉及脂质过氧化反应，LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰，是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱，脂质过氧化反应轻微；4）LDL的氧化修饰中，在氧化程度低时，ApoB降解；在氧化程度高时，ApoB又可发生再聚合。MDA-LDL的修饰中，ApoB无降解、聚合发生；5）Ox-LDL 的荧光峰波长为430nm，而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。

LDL氧化修饰的方式有很多种，常见的有：1）细胞介导的LDL氧化修饰，又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞，巨噬细胞，单核细胞都具有此功能；2）过度金属离子介导的LDL氧化修饰，如Ca²⁺，Fe²⁺等；3）还有其他形式的氧化修饰，包括物理方法如紫外线，或过氧化物酶催化。

本品是由红色荧光探针DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）标记的人源氧化LDL（Human Ox-LDL）。DiI- Ox-LDL具有高受体结合力，且是一种广为认知的胆gu醇递呈增强剂。可通过荧光显微镜或流式细胞仪来鉴定和观察细胞培养物内的泡沫细胞。也可用来诱导巨噬细胞的泡沫细胞形成。本品为无菌包装，可用PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养基直接稀释使用即可。

产品特性：

1） 浓度：1.0-4.0 mg/ml
2） 外观：乳状液体
3） 缓冲液组分：PBS（含EDTA），pH7.2-7.4

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，收到货后6周有效。避免强光直射，不可冻存！

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 本品的稀释工作液极不稳定，建议现配现用； 

2） 本品长期贮存可能会有沉淀析出，属于正常现象，低速离心2 min去除沉淀后使用即可；

3） LDL与LDL受体的结合需要Ca²⁺和Mn²⁺的参与，过量EDTA的存在会抑制其结合；

4） 关于脂蛋白的更多信息，可见懋康生物整理的脂蛋白（Lipoproteins）产品专题。

5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

1) 无菌条件下，将Human DiI-Ox-LDL用细胞培养基稀释至20-40 µg/ml。

2) 加入活细胞内，37℃培养3-6小时。

3) 孵育结束，吸去含Human DiI-Ox-LDL的培养基，并用无探针的培养基洗几次。

4) 根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

a) 荧光显微镜观察

采用标准的罗丹明激发：发射滤光片（或建议使用波长为：Ex/Em=554nm/571nm）；若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有机溶剂。【注】需设阳性细胞以做对照。

b）  流式细胞分选

胰蛋白mei处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液，选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照，从而进行流式分选设门（gate）。（建议使用波长为554 nm；Em：571nm）。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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