Pollen Viability Test Kit (TTC)

花粉活力检测试剂盒（TTC法）

产品信息

应用背景

花粉活力的大小直接影响授粉、受精过程，与植物的产量密切相关，通过花粉活力的测定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形态、生理特征，花粉活力的检测方法常用的有：花粉萌发测定法、碘-碘化jia（I2-KI）染色法、TTC染色法、过氧化物酶检测，MTT、FDA等方法。

产品描述

TTC，英文名2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride，中文名2,3,5-三苯基氯化四氮唑，又称为红四氮唑，是一种氧化还原指示剂，具有标准的氧化还原电位（80 mV）。溶于水形成无色溶液，还原后生成不溶于水的三苯基甲臜。此物质比较稳定，不易被氧化，因此，TTC广泛用于酶试验中测定花粉活力。

本花粉活力检测试剂盒（Pollen Viability Test Kit）就是基于TTC的特性，用作酶试验的氢受体，TTC还原量反映脱氢酶活性，从而判断花粉的活力。活力强的花粉染色后呈红色，弱活力的花粉染色后呈淡红色，无活力或不育的花粉呈无色。

试剂盒组成

注意事项

1） 本品开盖后请尽快使用，否则效率会下降。如果溶液变成红色，需弃用。

2） TTC染色液对人体有轻微刺激性，请注意小心防护；

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，6个月有效。

运输：冰袋运输。

操作方法【详见懋康网站整理】

2.1取适量的TTC染色液恢复至室温，混合均匀待用。

2.2取成熟将要开放的新鲜花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.3将花粉物质置于载玻片上，滴加1-2滴TTC染色液，盖上盖玻片。

【注】：染色时需将花粉完quan浸没于染色液中；

2.4恒温箱放置，低倍显微镜观察着色情况，每片取5个视野。

【注】：染色温度一般以25-35℃为宜。染色时间一般以30min-60min，具体根据实际情况调整。

三、染色结果观察：

活力强——红色；

活力弱——淡红色；

无活力或不育——无色。

计算：观察并统计100粒花粉，计算有活力花粉的百分数，其公式为：

花粉活力百分数（%）=有活力花粉数/100 ×100%

染色示例（来自文献，仅做参考）

文献来源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

试验对象：凤丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

试验目的：比较九种不同的花粉活力检测方法，包括：MTT、醋酸洋红、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 过氧化物酶、亚甲基蓝、FDA等，来鉴别有活力和无活力花粉。

试验结果：

FigComparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

试验结论：本课题中发现MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效区分有活力和无活力花粉，其中，FDA染色结果与花粉萌发结果类似。

文献来源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

试验对象：红薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

试验目的：花粉活力测定

试验图片：

FigComparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar = 200 μm. (b) TTC, bar = 200 μm. (c) Magenta acetate, bar = 200 μm. (d) FDA, bar = 200 μm. (e, f) In situ germination, bar = 500 μm. (g) In vitro germination, bar = 100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P < 0.001), and error bars represent standard deviations

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