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N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐
搜索关键词
Sulfo-NHS-Biotin;Sulfo-NHS;NHS N-羟基琥珀酰亚胺; Sulfo-SMCC;异型双功能交联剂;NHS酯(胺基指向);CAS NO:6066-82-6;CAS NO:119616-38-5;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物*su | MM3713-25MG | 25mg | 753 |
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物*su | MM3713-50MG | 50mg | 1153 |
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物*su | MM3713-100MG | 100mg | 2053 |
产品描述
磺基琥珀酰亚胺生物*su(Sulfosuccinimidyl Biotin, Sulfo-NHS-Biotin)适用于快速、有效的标记抗体、蛋白和其它含伯胺分子。Sulfo-NHS-Biotin具水溶性、膜非渗透性两大特征,特别适用于标记细胞表面蛋白。细胞表面生物*su化已成为一种重要的工具,用来研究受体和转运体的表达和调控、区分细胞质膜蛋白和定位在细胞器膜上的蛋白,以及极化上皮细胞的膜蛋白分布,等等。由于Sulfo-NHS-Biotin容易溶于极性溶液,琥珀酰亚胺环上的磺酸钠基团使其带电荷从而不能穿透细胞膜。只要细胞维持完整性,则仅有暴露在细胞表面的伯胺才能与其反应,从而将蛋白生物 *su化。
水不溶性版的Sulfo-NHS-Biotin是NHS-Biotin(Cat#:MM3705),是广泛使用的生物*su化试剂,两者的工作原理相同,:在生理至弱碱性缓冲液(pH 7-9)中,NHS-Biotin与伯胺(-NH2)反应形成稳定的酰胺键。蛋白(包括:抗体)通常含几种可作为标记靶标的伯胺,包括赖氨酸残基的侧链和每条多肽的N末端。我司提供几种不同的生物*su-NHS酯,具有不同的物理特性和臂长,包括:NHS-LC-Biotin、Sulfo-NHS-LC-Biotin。
产品特性
化学名:1-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoyloxy]-2,5- dioxopyrrolidine-3-sulfonate sodium | |
同义名:Sulfosuccinimidobiotin; Sulfosuccinimidyl biotin; Biotin 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt; N-hydroxysulfosuccinimidyl biotin; N-hydroxysulfosuccinimido biotin; Water-Soluble Biotin-NHS; 生物*su N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯;生物*suN-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐;N-羟基磺酸基琥珀生物*su; | |
CAS NO:119616-38-5 | 分子式:C14H18N3NaO8S2 |
分子量:443.4 g/mol | 间隔臂长:13.5 Å |
外观:粉末 | 纯度:≥98% HPLC |
化学结构式: |
保存与运输方法
保存:-20℃密封干燥保存,至少2年稳定。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 1 Sulfo-NHS-Biotin对湿度敏感,需置于-20℃密封干燥保存。避免处理产品过程中受潮,务必开盖前将本品平衡至室温。
2) 务必于使用前在溶解粉末,由于NHS酯官能团非常容易水化,从而失去反应性。因此,不要配制用来保存的储存液,丢弃任何未用完的溶液。
3) 避免使用含伯胺的缓冲液(比如:Tris、甘氨*suan),这些成分会竞争性排挤目的反应。如有必要,通过透析或脱盐的方式来更换成不含伯胺的反应缓冲液比如:PBS。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤(溶液内生物*su化蛋白)
1. 计算
生物*su标记率取决于蛋白上氨基分布、蛋白浓度和试剂用量。与高浓度蛋白参与的反应相比较,低浓度蛋白参与的反应需要更高摩尔过量的生物*su试剂,以达到相同的标记水平。使用20倍摩尔过量生物*su试剂来标记1-10mg/ml抗体(体积:0.5-2ml)的得率,是每个抗体上标记4-6个生物*su基团。使用50倍摩尔过量生物*su试剂标记50-200μg抗体(0.2-0.7ml)的得率,是每个抗体上标记1-3个生物*su基团。需调整Sulfo-NHS-Biotin与蛋白的摩尔比率来获取理想的插入率。
A.计算加入反应体系所需生物*su试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)的毫摩尔(millimoles)(20倍摩尔过量)
B.计算加入反应体系得到10mM生物*su试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)所需的微升量(μl,microliters)
2. 生物*su标记反应
2.1 从冰箱取出生物*su试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin),开盖前平衡至室温。
2.2 根据1计算所得,准备溶于PBS的蛋白溶液。
2.3 使用前,配制10mM生物*su试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)。
2.4 加入适量体积的10mM 生物*su试剂(如:Sulfo-NHS-Biotin)到蛋白溶液。
2.5 冰上孵育2h或室温孵育30min。
2.6 此时蛋白标记完成,溶液内虽有过量未反应和水解的生物*su试剂,但通常情况下,此时标记好的蛋白可以进行后续的ELISA或WB实验。一旦确认好标记蛋白的功能,再通过脱盐或透析的方法来纯化标记蛋白。
操作步骤(生物*su化细胞表面蛋白)
1. 用预冷PBS(pH 8.0)清洗细胞三次,以去除任何含胺培养基和分泌蛋白。
2. 用PBS(pH 8.0)重悬细胞使其浓度为~25×106细胞/ml。
3. 按照1ml细胞悬液加入1mg Sulfo-NHS-Biotin(得到~2mM生物*su试剂)。或,按照1ml细胞悬液加入200μl 10mM生物*su试剂。
4. 室温孵育30min。【注意】:4℃孵育可能减低生物*su试剂的内在化反应。
5. 用PBS(pH 8.0)+100mM甘氨*suan清洗细胞三次以淬灭和去除过剩的生物*su试剂和副产物。
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货号 | 名称 | 规格 |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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