Pollen Viability Test Kit (I2-KI)

花粉活力检测试剂盒（I2-KI法）

产品信息

应用背景

花粉活力的大小直接影响授粉、受精过程，与植物的产量密切相关，通过花粉活力的测定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形态、生理特征，花粉活力的检测方法常用的有：花粉萌发测定法、碘-碘化jia（I2-KI）染色法、TTC染色法、过氧化物酶检测，MTT、FDA等方法。

产品描述

碘-碘化jia（Iodine-potassium Iodide,I2-KI）是常用的花粉活力染色方法之一，工作原理在于：大多数植物正常成熟的花粉呈规则形状，如圆球形或椭球形、多面体等，且积累较多淀粉，用I2-KI染色，可被染成蓝色。而发育不良的花粉常呈畸形，往往不含淀粉或积累较少淀粉，用I2-KI染色，或不被染色或被染成黄褐色。因此，根据花粉的染色情况，能鉴别出花粉的活力。

试剂盒组成

注意事项

1） 本品开盖后请尽快使用，否则效率会下降。

2） I2-KI染色法不能准确表示花粉的活力，也不适用于研究某一处理下对花粉活力的影响。因为核期退化的花粉已累积有淀粉，用I2-KI染色呈蓝色；另外，含有淀粉而被杀死的花粉用I2-KI染色也会呈蓝色。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法【详见懋康网站整理】

2.1取成熟将要开放的新鲜花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.2将花药物质置于载玻片上，滴加1滴蒸馏水，用镊子或其他工具将花药捣碎，使得花粉粒释放出来。

2.3滴加1~2滴I2-KI染色液【注：需将花粉完quan浸没于染色液中】，盖上盖玻片，光学显微镜下观察。

2.4观察2~3张装片，每片取5个视野，统计花粉的染色率，以染色率表示花粉的育性。

三、染色结果观察：

活力强——蓝色；

活力弱——不被染色或被染成黄褐色；

无活力或不育——无色。

计算：观察并统计100粒花粉，计算有活力花粉的百分数，其公式为：

花粉活力百分数（%）=有活力花粉数/100 ×100%

染色示例（来自文献，仅做参考）

文献来源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

试验对象：凤丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

试验目的：比较九种不同的花粉活力检测方法，包括：MTT、醋酸洋红、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 过氧化物酶、亚甲基蓝、FDA等，来鉴别有活力和无活力花粉。

试验结果：

FigComparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

试验结论：本课题中发现MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效区分有活力和无活力花粉，其中，FDA染色结果与花粉萌发结果类似。

文献来源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

试验对象：红薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

试验目的：花粉活力测定

试验图片：

FigComparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar = 200 μm. (b) TTC, bar = 200 μm. (c) Magenta acetate, bar = 200 μm. (d) FDA, bar = 200 μm. (e, f) In situ germination, bar = 500 μm. (g) In vitro germination, bar = 100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P < 0.001), and error bars represent standard deviations

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