ELISA实验不显色的原因
时间:2017-08-30 阅读:5311
ELISA实验不显色的原因,很多科研新手,可能都有这样子的困扰,对于elisa实验做的不理想,不显色也有很多无奈,下面我们金益柏的操作人员就给您介绍一些详细的elisa不显色的原因以及处理方法。
ELISA实验不显色的原因图片
ELISA实验不显色的原因:
1.包被原:包括你的包被液有无问题,有没有配错。包被原一般加100微升,37度2小时;
2.封闭:封闭液用的是否适合?你说做了几次都没显色,空白孔也不显吗?如果空白也无颜 色,那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔,也可以满孔封闭
3.一抗:检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应
4.二抗:底物,底物缓冲液……这些都要好好检查!
5.洗涤:用PBST洗涤,包被和封闭时洗板3次;一抗二抗洗涤5次,每次间隔3分钟。手工和机器洗涤没什么不同,就是省力一些。洗5次不会有负影响,在一抗和二抗洗涤过程中,恰恰需要多洗几次,这样有助于减少非特异性吸附。