犬elisa试剂盒操作注意事项：

　　1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

　　3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

　　6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

　　7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

　　8）加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

　　9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　试剂准备

　　a.使用前所有试剂应置于室温平衡至少30分钟。

　　b.本试剂盒可以直接加样，如浓度过高，可以进行适当比例的稀释（推荐2-5倍稀释），计算时应将结果乘以稀释的倍数。

　　c.洗涤液为25倍浓缩液，使用前将所有洗涤液倒入500ml或1L的烧杯中，用双蒸水定容到500ml即为工作液。

　　d.标准品的稀释：先用标准品/样品稀释液将标准品冻干粉定容到150μl，然后漩涡混匀30秒即为标准品原液（24小时内用完）。EDN1试剂盒；犬内皮素1(EDN1)ELISA试剂盒取5支干净的Eppendorf管，每管加150μl的标准品稀释液，分别标记上160ng/L,80ng/L,40ng/L,20ng/L ,10ng/L .取150μl标准品原液加入标记160ng/L 的管中，混匀后同样取出150μl，加入下一管，以此类推直至后一管。零孔：直接加标准品/样品稀释液。

　　e.生物素抗原的稀释：抽取生物素抗原稀释液1ml到浓缩型生物素抗原中，漩涡混匀15秒至冻干粉*溶解，然后将所有液体移入稀释液瓶中,再次漩涡混匀30秒即为生物素抗原工作液。

　　f.亲和素-HRP的稀释：低速离心（使浓缩液全部沉到管底），将浓缩亲和素-HRP全部移入相应稀释液中然后漩涡混匀30秒即为亲和素-HRP工作液。