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检测人血清标本时,需要仔细认真,在遇到问题时冷静对待。我公司总结了以下几点需要注意:
1、本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
2、冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
3、浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
4、反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
人血清使用中应注意以下几点要求:
1、避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2、实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3、不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
5、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
8、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
9、洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
10、底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。