磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶测试盒100管/96样 分子生物试剂
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磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶测试盒100管/96样 分子生物试剂

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2022-12-04 09:50:26
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产品简介

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详细介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

货号

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶测试盒100/96

100/96

BJ-01S9796

商品介绍:

测定意义
  PEPC
EC 4.1.1.31)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶,对三羧酸循环的运转起重要调节作用。

测定原理:

PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算PEPC活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

优点如下:
1
、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2
、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD
3
、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4
、稳定性好:试剂盒28存放6个月有效。
5
、再现性好:变异系数CV=1.7%
6
、回收试验: X =103.3%
7
、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8
、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
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Amitrole,10ng/ul
标准品 Bromopropylate  10ng/ul于甲醇,10ML 特征形态 液态

双甲脒 标准品 Bromophos-methyl  10ng/ul于环己烷,10ML 特征形态 液态

44-二氨基二苯硫醚,10ml 标准品 4-Aminophenylthioether(4,4-Thiodianiline)  10ng/ul于乙腈,10ML 特征形态 液态
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合成 标准品 PCB4 2444-46-4 0.1g

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盐酸万古 标准品 PCB8 1404-93-9 纯品型,0.1g
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操作流程:
1.]
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4
2.
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不浓度的标准品50μL
3.
样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.
除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37水浴锅或恒温箱温育60min
5.
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.
每孔加入底物AB50μL37避光孵育15min
7.
每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


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