线粒体活性氧产生速率测试盒100管/96样分子生物试剂-上海邦景实业有限公司手机版

详细介绍

商品介绍：

测定意义
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，研究表明，机体95％以上的活性氧（ROS）都来自于线粒体，其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。

正常情况下，细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态，细胞内活性氧（ROS）水平维持在较低的生理范围；在病理情况下，细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破，细胞内活性氧水平过多，就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸，使机体出现氧化应激，同时，活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤，导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。

因此，通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。

测定原理：

荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜，在线粒体内被酯酶水解，形成无荧光的DCFH，DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合，线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。

需自备的仪器和用品：

多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。

生化法检测试剂盒：分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法，自主，专业技术团队，操作简便快捷，规格合理、系列成套，价格合理，是广大科研工作者的选择，详细产品咨询：
产品名称：线粒体活性氧产生速率测试盒100管/96样
产品规格：100管/96样
检测方法：荧光法
产品货号：BJ-01S9599

实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。产品仅用于科研
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。

优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
4、再现性好：变异系数CV=1.7%。
5、回收试验： X =103.3%。
6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （通过过滤）。
4 ）. 通过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点为：
（1）应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收，因此均可借此法加以测定。到目前为止，几乎化学元素周期表上的所有元素（除少数放射性元素和惰性元素之外）均可采用此法。
（2）灵敏度高
由于相应学科的发展，使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展，从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用，在标准参考物质的研制中，它更受重视，很多光度分析法已制定成为标准方法。
（3）选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定，如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定，已有比较满意的方法了。
（4）准确度高
对于一般的分光光度法来说，其浓度测量的相对误差在1-3%范围内，如采用示差分光度法测量，则误差往往可减少到千分之几。
（5）适用浓度范围广
可从常量（1-50%）（尤其是使用示差法）到痕量（10-6-10-8%）（经预富集后）。
（6）分析成本低、操作简便、快速。
香蕉炭疽盘长孢菌

地霉属

戊糖乳杆菌

光滑念珠菌KTCC0001冻干粉

头状丝孢酵母

抗辐射链霉菌
2，3，5-三标准品 Cadusafos 697-82-5 纯品型，0.25G

2,4,4-Trimethyl-2-pentene,certified 标准品 Vancomycinhydrochloride 107-40-4 纯品型，1ml

2，4，4-Trimethyl-1-pentene，certified 标 Chlorobenzilate 107-39-1 纯品型，1ML
停乳链球菌

园弧青霉=桔灰青霉

苏云金芽胞杆菌日本亚种Bacillusthuringiensissubsp.japanensis

缓冲蛋白胨水90ml/瓶

灵芝(红芝，赤芝)

不动杆菌
苯氧乙酸标准品 Perfluorobutanesulfonicacid 122-59-8 纯品型，0.25G

右旋反式苯氧司林/吩斯标准品 m-Terphenyl 26046-85-5 纯品型，0.1g

苯醚菊酯标准品 sec-Pentylbenzene(sec-Amylbenzene) 26002-80-2 纯品型，0.1g
线粒体活性氧产生速率测试盒100管/96样丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒

醇脱氢酶（ADH）测试盒

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