NAD激酶测试盒100管/48样 分子生物试剂
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NAD激酶测试盒100管/48样 分子生物试剂

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2023-03-14 09:43:47
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产品简介

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详细介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

货号

NAD激酶测试盒100/48

100/48

BJ-01S9512

商品介绍:

测定意义


NADKEC 2.7.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)NADP(H)的平衡上具有重要作用。


测定原理:

NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPHNADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT),通过在600 nm下测定MTT的还原速度(吸光值的变化)可反映出NADK活性的大小。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

优点如下:

1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。

2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD

3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。

4、稳定性好:试剂盒28存放6个月有效。

5、再现性好:变异系数CV=1.7%

6、回收试验: X =103.3%

7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。

8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。

注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
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操作流程:

1.]从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不浓度的标准品50μL

3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37水浴锅或恒温箱温育60min

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物AB50μL37避光孵育15min

7.每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。





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