二核酮糖羧化酶测试盒50管/48样 分子生物试剂
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2023-04-13 09:20:06
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产品简介

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详细介绍

操作流程:
1.]
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4
2.
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不浓度的标准品50μL
3.
样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.
除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37水浴锅或恒温箱温育60min
5.
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.
每孔加入底物AB50μL37避光孵育15min
7.
每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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产品名称

规格

货号

二核酮糖羧化酶测试盒50/48

50/48

BJ-01S10184

商品介绍:

测定意义
 
核酮糖-1,5-二核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco, EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。

测定原理:

1)在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-15-二(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-甘油酸(PGA);(2PGA可通过外加的3-甘油酸激酶和甘油醛-3-脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-,伴随着NADH氧化生成NAD+;(3)在340 nm NADH有特征吸收峰,而NAD+没有此吸收峰,因此测定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco的羧化酶活性。

需自备的仪器和用品:

可见-紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

优点如下:
1
、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2
、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD
3
、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4
、稳定性好:试剂盒28存放6个月有效。
5
、再现性好:变异系数CV=1.7%
6
、回收试验: X =103.3%
7
、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8
、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。

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