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操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
商品属性:
产品名称:人横纹肌肉瘤细胞:TE671 subline No.2
货号:BJ-X96802
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
分类:细胞系
商品介绍:
名称 TE671 subline No.2 (人横纹肌肉瘤细胞) 年龄(性别) 7岁 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 背景描述 TE671 subline No.2细胞表达N型乙酰和外周型苯二氮的受体. 生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例 1:3-1:4 推荐换液频率 2~3次/周 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:产品仅用于科研
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
DiOC6(3) 碘化物100mg DNA 电泳分子量标准 (100-1500 bp)50 次
ER-Tracker Red( 内质网红色荧光探针 )20μL DNA 采样拭子 50 支
Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 )250μL DNA 包被溶液100mL
Fluo-3,五铵盐1mg DNA UV 防护剂3g
Fluorescein-5-maleimide25mg DNA Shuffling 试剂盒10 次
仓鼠脂联素,含C1Q和胶原域(ADIPOQ)elisa检测试剂盒免费代测
仓鼠载脂蛋白B(APOB)elisa检测试剂盒
仓鼠血红素氧合酶1(HO-1)elisa检测试剂盒
仓鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)elisa检测试剂盒
仓鼠P450,家族7亚科A多肽1(CYP7A1)elisa检测试剂盒免费代测
人横纹肌肉瘤细胞:TE671 subline No.2大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)elisa检测试剂盒
大鼠TAR DNA结合蛋白43(TARDBP)elisa分析检测试剂盒
大鼠TAR DNA结合蛋白43(TARDBP)elisa检测试剂盒
大鼠Tau蛋白elisa分析检测试剂盒
大鼠Tau蛋白elisa检测试剂盒免费代测