人T淋巴细胞系:H9 细胞株类
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人T淋巴细胞系:H9 细胞株类

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2023-08-05 09:20:24
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产品简介

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详细介绍

商品属性:
产品名称:
T淋巴细胞系:H9
货号:BJ-X96815
规格:1×10cells/T25培养瓶
分类:细胞系
商品介绍:

名称 H9 (T淋巴细胞系)
 
别称 HT clone H9;   HT(H9); H 9; H-9

种属 人类

年龄(性别) 53

组织来源 T淋巴细胞

生长特性 悬浮细胞

细胞形态 淋巴母细胞样

背景描述 H9细胞是HuT 78细胞的克隆系;H9细胞表面带有CD3CD4标记。研究表明,H9细胞对人体免疫缺陷病毒(HIV-1)敏感,可用于检测、分离和增殖HIV-1,也可用于其它人类T细胞病毒的研究。

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推荐传代比例 5×10^5-2×10^6cells/ml

推荐换液频率 2~3/

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37

注意事项 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。

保藏机构 ATCC; HTB-176   ECACC; 85050301

细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
产品仅用于科研
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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操作要点:
1
)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2
)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3
)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4
800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5
)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6
)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。


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