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商品介绍:
名称 CIK细胞
产品概述
CIK细胞,即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer,CIK)是一种新型的免疫活性细胞,CIK增殖能力,细胞毒作用,具有一定的免疫特性。
由于该细胞同时表达CD3+和CD56+两种膜蛋白分子,故又称为NK细胞(自然杀伤细胞)样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞大的抗瘤活性,和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。该细胞对肿瘤细胞的识别能力很,如同“细胞”,能精确“点射”肿瘤细胞,但不会伤及“无辜”的正常细胞。尤其对手术后或放后患者,能消除残留微小的转移病灶,防止癌细胞扩散和复发,提高机体免疫力,因此,CIK细胞被认为是新一代的肿瘤过继细胞免疫治疗的方案。
CIK细胞可以通过多机制抗肿瘤、抗病毒:
1.CIK细胞能以不同的机制识别肿瘤细胞,通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的肿瘤细胞膜进行胞吐,释放穿孔素、颗粒酶,实现对肿瘤细胞的裂解;
2.CIK细胞能分泌IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-6等多种炎性细胞因子,对肿瘤也有直接抑制作用;
3.CIK细胞可以通过配体-受体(Fas:FasL)介导的方式诱导肿瘤细胞凋亡,因此CIK尤其适用于FasL阳性肿瘤的治疗;
4.CIK细胞分泌的细胞因子能显著刺激初始型T细胞增殖,有效激活机体的免疫系统,使之趋于正常,提高病人自身抗肿瘤的能力。
目前,肿瘤的发生机制尚未形成普遍接受的理论。研究者普遍认可肿瘤的发生、发展与人体的免疫功能密切相关。即在正常情况下,肿瘤与机体的防御机能之间处于一种动态的平衡,而一旦这种平衡被破坏,就可能发生肿瘤。身体各组织细胞受到外界化学、物理、生物等因素刺激或自身细胞衰老变异等因素的影响,使得体内某些细胞发生突变,成为癌前细胞;而机体免疫功能低下或者由于免疫异常,无法及时识别、杀伤、清除这些异常细胞,突变细胞在组织内复制生长,达到一定数量后破坏器官功能,肿瘤即发生。肿瘤患者,尤其是恶性肿瘤病人往往免疫功能、特别是细胞免疫功能低下,因而疾病呈进展、活动、预后差。因此,提高机体免疫力,建立有效的免疫应答是治疗肿瘤有希望的途径。CIK细胞治疗即将大量杀伤性高、功能、数量多的免疫活性细胞回输患者体内,直接发挥杀死肿瘤细胞的作用,并通过调节、激活患者的免疫体系,调动、提高患者自身的抗肿瘤能力。
CIK细胞具有以下突出的特点:
1.增殖速度快,杀瘤活性高。CIK细胞可以在体外大量扩增,培养14天可以增殖200倍以上,其效应细胞CD3+CD56+的增殖可达1000倍以上,抗肿瘤活性得以大大增。
2.杀瘤谱广。CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤是非MHC限制的,对多种肿瘤细胞均有杀灭作用。
3.能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasL凋亡。CIK细胞虽然在Fas被占据后会引起少量细胞凋亡,但对其杀瘤细胞毒性没有明显影响;反之,CIK细胞可以诱导FasL阳性肿瘤细胞的凋亡。
4.对多重耐药肿瘤细胞同样敏感。CIK细胞对放、敏感的亲本细胞和不敏感的转化细胞均具有大的杀伤活性。
5.CIK细胞杀瘤活性不受CsA(A)和FK506(普乐可复)等免疫抑制剂的影响。
6.对正常骨髓造血前体细胞毒性小,仅对红系生成产生轻微的抑制,这可能与CIK细胞自身分泌高水平的IFN-γ有关。
7.CIK细胞具有识别肿瘤的机制,特异性,对正常的细胞无毒性作用。
8.安全性好。CIK细胞是活化的患者自体细胞,应用安全,不会产生排斥等反应,患者副反应小。
产品名称 | 规格 | 分类 | 货号 |
1×10⁸Cells/T25培养瓶 | 免疫细胞及干细胞 | BJ-X97750 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
| 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
沙保罗琼脂平板90mm 玫瑰产色链霉菌
新鞘氨醇单胞菌 园弧青霉=桔灰青霉
蘑菇假单胞菌 盘长孢菌(鲁保一号)
糙孢曲霉 霉
桔青霉 无花果曲霉
鸡α1酸性糖蛋白(OGCHI)elisa分析检测试剂盒
鸡α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)elisa分析检测试剂盒
鸡Toll样受体4(TLR4)elisa分析检测试剂盒
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa分析检测试剂盒
鸡L苯丙解氨酶(PAL)elisa分析检测试剂盒
CIK细胞兔白介素12(IL-12/P70)elisa检测试剂盒
兔白介素17(IL-17)elisa分析检测试剂盒
兔白介素17(IL-17)elisa检测试剂盒
兔白介素18(IL-18)elisa检测试剂盒
兔白介素1βelisa检测试剂盒
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