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产品名称 | 规格 | 分类 | 货号 |
人胚肾细胞:293 [HEK-293] | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 细胞系 | BJ-X96321 |
商品介绍:
名称 293 [HEK-293] (人胚肾细胞)
别称 Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293
种属 人类
年龄(性别) 胎儿
组织来源 胚胎肾;以腺病毒5DNA进行转化
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
背景描述 293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞,293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。
生物安全等级 2
生长培养基 MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~24-30小时
冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮
培养条件 气相:空气,95%;CO₂,5%温度:37℃
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受体表达情况 vitronectin
注意事项 该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
22RV1 (人前列腺癌细胞) 人前列腺癌细胞:22RV1 1×10⁶cells/T25培养瓶
293T [HEK-293T](人胚肾细胞) 人胚肾细胞:293T [HEK-293T] 1×10⁶cells/T25培养瓶
3T3-L1 (小鼠胚胎成纤维细胞) 小鼠胚胎成纤维细胞:3T3-L1 1×10⁶cells/T25培养瓶
4T1 (小鼠乳腺癌细胞) 小鼠乳腺癌细胞:4T1 1×10⁶cells/T25培养瓶
6T-CEM (人T细胞白血病细胞) 人T细胞白血病细胞:6T-CEM 1×10⁶cells/T25培养瓶
769-P (人肾细胞腺癌细胞) 人肾细胞腺癌细胞:769-P 1×10⁶cells/T25培养瓶
786-O [786-0] (人肾透明细胞腺癌细胞) 人肾透明细胞腺癌细胞:786-O [786-0] 1×10⁶cells/T25培养瓶
95-D [PLA-801D] (人高转移肺癌细胞) 人高转移肺癌细胞:95-D [PLA-801D] 1×10⁶cells/T25培养瓶
A172 (人胶质母细胞瘤细胞) 人胶质母细胞瘤细胞:A172 1×10⁶cells/T25培养瓶
A2780 (人卵巢癌细胞) 人卵巢癌细胞:A2780 1×10⁶cells/T25培养瓶
A-375 (人恶性黑色素瘤细胞) 人恶性黑色素瘤细胞:A-375 1×10⁶cells/T25培养瓶
A-431 (人表皮癌细胞) 人表皮癌细胞:A-431 1×10⁶cells/T25培养瓶
A549 [A-549] (人非小细胞肺癌细胞) 人非小细胞肺癌细胞:A549 [A-549] 1×10⁶cells/T25培养瓶
A-673 (人横纹肌肉瘤细胞) 人横纹肌肉瘤细胞:A-673 1×10⁶cells/T25培养瓶
A9 (小鼠皮下结缔组织细胞) 小鼠皮下结缔组织细胞:A9 1×10⁶cells/T25培养瓶
AAV-293 (人胚肾细胞) 人胚肾细胞:AAV-293 1×10⁶cells/T25培养瓶
Acc-2 (人涎腺腺样囊性癌细胞) 人涎腺腺样囊性癌细胞:Acc-2 1×10⁶cells/T25培养瓶
Alpha-Synuclein 核突触蛋白抗体
beta-Actin (Loading Control) β-肌动蛋白/β-Actin 抗体(内参抗体)
beta-Amyloid 1-42 (CT) β淀粉样肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗体
beta Amyloid 1-16 β淀粉样肽1-16/Aβ1-16抗体
beta Amyloid 1-28 β淀粉样肽1-28/β-Amyloid 1-28抗体
ARIP2a 激活素受体2A抗体
Aquaporin 5 水通道蛋白5抗体
beta Amyloid 1-40 β淀粉样肽(1-40)抗体
beta Amyloid 1-42 β淀粉样肽(1-42)抗体
APOA1 载脂蛋白A1抗体
Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗体
Ankyrin B 锚定蛋白B抗体
ATP7A 铜转运蛋白质α链抗体
Amphetamine(2A3F)
ASMTL ASMTL蛋白抗体
TRA16 激素受体相关蛋白16抗体
人胚肾细胞:293 [HEK-293] beta-Amyloid 1-40 (CT) β淀粉样肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗体
ASB13 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族13抗体
beta Amyloid 31-35 β淀粉样肽(31-35)/Aβ 31-35 抗体