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生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
中文名称:BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞
英文名称:BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell
产品规格:100μl×10管
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0164556
产品介绍:
本品适合毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达10^7BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞是大肠杆菌BL21(DE3)pLysS经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。该菌株携带pLysS质粒,具有氯抗性(Camr),PLysS含有表达T7的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。 基因型:F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。 储存条件:-80℃ 组份: BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞 100μl×10 pUC19(0.1 ng/μl) 5μl 注意事项 1)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。 2)待转化DNA加入体积不要过感受态细胞体积的1/10。 3)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。 4)为确保高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。 5)本品应于-80℃保存,请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。 6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
PH检测试剂专题
肿瘤检测试剂专题
蛋白制备试剂专题
细菌可溶性膜蛋白制备试剂盒
细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒
DL-赖 DL-Lysine 质量规格:>98%,BR ratProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit大鼠前列E1(PGE1)elisa规格:96T/48T
DL-精盐酸盐 DL-Arginine 质量规格:>98%,BR HelicobacterpyloriRFLP基因分析试剂盒20
肉碱;BT; L(-)-Carnitine 质量规格:>98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-Ⅰelisa小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa规格:96T/48T
;肉碱(标准品) Levocarnitine;L(-)-Carnitine 质量规格:HPLC含量测定 小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)elisa ,英文名: ssDNA ELISA Kit
L-谷钠,一水 L-Glutamic acid mono salt hydrate 质量规格:>99% 大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA检测试剂盒Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T
L-(标准品) L-Glutamine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人单疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗体(IgM)试剂盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgM)ELISA kit
(还原型) Glutathione (Reduced);GSH 质量规格:>98%,BR RatProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit大鼠前列E2(PGE2)elisa规格:96T/48T
L-(标准品) Glutathione (Reduced) 质量规格:HPLC>98%,标准品,还原型 Helly固着液50毫升
(氧化型) Glutathione(Oxidized) 质量规格:度大于98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-Ⅱelisa小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa规格:96T/48T
DL-异亮 DL-Isoleucine 质量规格:>99%,BR 小鼠抗单核细胞抗体(AMA)elisa ,英文名: AMA ELISA Kit
BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞 (二水) Formoterol fumarate 质量规格:>98.5%,二水合物 大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA检测试剂盒RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 96T/48T
(无水) Formoterol fumarate 质量规格:>98.5%,无水,EP 大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)试剂盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit
法罗培南(钠)(2.5水) Faropenem 质量规格:度>99.0%,BR 大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)ELISA检测试剂盒RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit 96T/48T
Faropenem 质量规格:标准品用于含量测定 大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)试剂盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit
奥司他 Orlistat(synthesis) 质量规格:≥98.0%,BR 大鼠可溶性白介素-2 受体(sIL-2R)试剂盒 Rat soluble ierleukin-2 receptor,sIL-2R ELISA Kit
福钠;福SV钠 Rifamycin salt 质量规格:>900IU/mg ,BR 大鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA检测试剂盒RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T
Octreotide acetate 质量规格:≥98%,BR 大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)试剂盒 Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit
S(+)-2-氨基-1-丁醇 (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 质量规格:>99%,液态,0.944 g/mL ,25℃ 大鼠可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)试剂盒 Rat Soluble Lectin-like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor-1,sLOX-1 ELISA Kit
D-鞘氨醇 trans-D-erythro-sphingosine 质量规格:度≥98% 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA检测试剂盒RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 96T/48T
糖脂;植物鞘胺醇 ribophytosphingosine 质量规格:≥98%,进口原装 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒 Rat Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。