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链霉亲和素磁珠是一种高度均匀的超顺磁性微球，表面包覆着高密度的超纯链霉亲和素（＞97%）。微球经过专门设计、测试和质量控制，可用于免疫沉淀、细胞分选、快速单步捕获生物su化分子，如 DNA、RNA、抗体或细胞裂解物或杂交反应中的蛋白质等。链霉亲和素（或抗生素多倍体）和生物su之间的相互作用表现出已知的高非共价相互作用之一。抗生物su、链霉亲和素、单体抗生物su及其类似物已成为探针和亲和配体的有力工具，在生化分析、诊断、亲和纯化和药物传递等领域有着广泛的应用。链霉亲和素是一种四聚体生物su结合蛋白，源于链霉菌亲和素 II，质量为 60000 道尔顿。链霉亲和素不含碳水化合物，pI 较低，非特异性结合程度较低，使链霉亲和素成为许多检测系统的理想试剂选择。

产品特点: 使用链霉亲和素-生物su结合系统的优点和益处：

·亲和力：链霉亲和素是同源四聚体，具有较高的生物su结合亲和力，具有KD~10−14 米。

·高稳定性：生物su结合复合物具有优异的稳定性，可抵抗 pH、温度（2°C 和40°C）、苛刻的有机溶剂、变性剂（如氯化胍）、洗涤剂（如 SDS）和蛋白水解酶。

·突出的选择性和特异性：生物su和链霉亲和素的相互作用具有高度的特异性，确保了较低的非特异性结合。

·高灵敏度：高稳定性和特异性确保了高检测灵敏度。

·非常灵活：生物su的小尺寸和显著稳定性被证明非常适合相对容易地并入各种分子，例如合成聚合物、荧光团、小分子或生物分子中的特定位置，从而对共轭生物分子的结构和功能施加小的扰动。

链霉亲和素磁性微球的优点：

·快速、简单且一步到位的高通量程序：消除了柱状物或过滤器，或重复费力的移液或 离心（图 1） ·高结合能力 ·表现出较低的非特异性结合 ·可扩展-可轻松调整样本大小和自动化

所需材料 ·

Binding Buffer: 1x PBS, 0.1% BSA, pH 7.4 ·磁力分离器（适用于手动操作）： 根据实验时生物样品的体积，使用者可以选择以下不同型号的磁力分离器： 8孔磁力架 可以容纳8个单独的1.5-2.0 ml 离心管 ; 24孔磁力架可以容纳24个单独的1.5-2.0 ml离心管; 4孔磁力-15可以容纳 4个单独的15ml离心管; 4孔磁力架-50可以容纳四个单独的50 ml离心 管。

操作过程：

注: · 该方案是一种通用亲和纯化程序。为了获得佳结果，每个用户应确定纯化单个目标蛋白的佳工作条件。

·根据粗样品中目标生物su化分子的数量（基于珠子结合能力），优化每种应用中使用的珠子数量。使用过多的磁珠会导致背景较高，而使用过少的磁珠会导致产量较低。

1. 将佳量的珠子转移到离心管中。将管放在磁力架上1-3分钟。在管留在分离器上的同时去除上清液。

2. 取下试管，用5倍体积的 1x Binding/Washing Buffer通过涡流清洗珠子30秒。将试管置于室温下1-3分钟。将管放在磁力架上1-3分钟。在管留在分离器上的同时去除上清液。

3. 重复步骤二两次。

向含有目标分子的粗样品中加入洗涤过的珠子，并在室温或所需温度下培养1-2小时（温度越低，培养时间越长）。

注: 强烈建议进行滴定以优化培养时间。更长时间的孵育可能导致更高的背景。

4. 如步骤 2 所述清洗磁珠，直到 280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。

注: 添加更高浓度的盐、非离子洗涤剂和还原剂可降低非特异性背景。例如，向洗涤缓冲液中添加NaCl（高达1-1.5 M）、0.1-0.5%的非离子洗涤剂，如Triton X 100或吐温20。

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