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公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
产品名称 | 规格 | 货号 |
大肠杆菌蛋白提取液 | 100ml | BJ-PJ6654 |
描述:生产的大肠杆菌蛋白提取液采用的中性裂解 配方,从而大限度的提高了后续提取蛋白的活性。使用该 溶液从大肠杆菌中提取蛋白不需要超声波破碎等复杂的操 作步骤,溶液置于 4°C 可长期保存,使用方便。该溶液室温 30min 可破碎 95%以上的细胞,裂解后的溶液可直接通过 Ni-NTA 等纯化填料进行蛋白纯化。该溶液既可适用于小量 蛋白表达检测,也适用于大量蛋白的表达纯化试验;既适用 于纯化可溶型蛋白,也适用于纯化包涵体蛋白。
主要特征
♦ 单组分溶液,使用方便
♦ 裂解迅速,蛋白不会变性
♦ 适用于小量或大规模蛋白表达
♦ 适用于可溶性蛋白和包涵体纯化
应用:大肠杆菌的裂解和包涵体纯化。
储存:置于 4°C 可保存 2 年。
操作方法
♦ 可溶型蛋白操作方法(1 ml 菌液为例)
1. 8,000rpm 室温离心 3min 后,弃上层培养基,留取管底部菌体(尽量弃除掉培养基)。
2. 加入 200 μl(重悬体积不得少于 50 μl)大肠杆菌蛋白提取液重悬菌体,用吸头吹打至无可见细胞团块。
注:为降低溶液粘度,可加入 Benzonase 核酸内切酶至 0.25U/μL;加入终浓度为 1 mg/ml 的溶菌效果更佳。
3. 置于室温孵育 30-60min,期间轻弹离心管数次以加速裂解。
4. 裂解完成后 13,000rpm 于 4℃离心 15-20min,将上清转移至新的容器中,溶液可直接进行下一步纯化或检测试验。
♦ 包涵体蛋白操作方法
5. 上述步骤 4 中,弃上清,保留沉淀组分,用 200 μl 的大肠杆菌蛋白提取液重悬沉淀。
6. 加入溶菌至终浓度 1 KU/ml,混合均匀,室温孵育 10min。
7. 加入 800 μl 的灭菌水混合均匀。
8. 13,000 rpm 室温离心 15-20min,弃上清后用 900 μl 灭菌水重悬沉淀,然后加入 200 μl 大肠杆菌蛋白提取液,混合均匀。
9. 13,000rpm 室温离心 15-20min,重复步骤 8 三至五次。
10. 将沉淀溶解于变性溶液中,进行下一步纯化或复性试验。
公司正在出售的产品:
铁调节蛋白1封闭多肽 | 人卵巢颗粒肿瘤细胞 |
1号染色体开放阅读框147封闭多肽 | 小鼠杂交瘤细胞;W6/32 |
自噬相关蛋白10封闭多肽 | 兔肾细胞;RK13 |
1号染色体开放阅读框177封闭多肽 | 杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 |
碳suan酐mei相关蛋白8封闭多肽 | 寨卡病毒RT-PCR试剂盒 |
磷suan化p38MAPK封闭多肽 | 皱褶青霉PCR试剂盒 |
FLIP封闭多肽 | 病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核suan检测试剂盒 |
神经突触su1封闭多肽 | 波氏杆菌(博代氏杆菌,博德特氏杆菌)通用PCR试剂盒 |
20号染色体开放阅读框50封闭多肽 | 皱纹毛圆线虫PCR试剂盒 |
人视网膜上皮细胞 | 传染性脓疱皮炎病毒PCR检测试剂盒 |
兔晶状体上皮细胞 | 血管抑su/血管稳定蛋白ELISA试剂盒 |
小鼠淋巴瘤细胞;EL4 | B-细胞淋巴瘤因子3ELISA试剂盒 |
人肝母细胞瘤细胞;HuH-6 | 大肠杆菌蛋白提取液醛糖还原mei相似蛋白1ELISA试剂盒 |
杂交瘤细胞株;DS2D3 | Canopy2同源物ELISA试剂盒 |
大鼠腮腺细胞 | CREB/ATFBZIP转录因子ELISA试剂盒 |