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NMY51 感受态细胞100ul*10以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
NMY51 感受态细胞100ul*104. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
NMY51 感受态细胞100ul*103. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml,过高的浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
DNP-Ab 人抗脱氧核糖核蛋白抗体 规格: 48T/96T
PsmAb 人抗突触前膜抗体 规格: 48T/96T
MCV 人抗突变型瓜氨酸波型蛋白抗体 规格: 48T/96T
MCV 人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体 规格: 48T/96T
aZP 人抗透明带抗体 规格: 48T/96T
n-DNA-Ab 人抗天然脱氧核糖核酸抗体 规格: 48T/96T
glycolipid 人抗糖脂抗体 规格: 48T/96T
GP 人抗糖蛋白抗体 规格: 48T/96T
MAG 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体 规格: 48T/96T
anti-myelin Ab 人抗髓磷脂抗体IgA 规格: 48T/96T
anti-myelin Ab 人抗髓磷脂抗体IgA 规格: 48T/96T
dsDNA 人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格: 48T/96T
HAMA 人抗鼠抗体 规格: 48T/96T
GHAb 人抗生长激素抗体 规格: 48T/96T
GHAb 人抗生长激素抗体 规格: 48T/96T
GBM 人抗肾小球基底膜抗体 规格: 48T/96T
TBM 人抗肾小管基底膜抗体 规格: 48T/96T
AAA 人抗肾上腺皮质抗体 规格: 48T/96T
AAA 人抗肾上腺皮质抗体 规格: 48T/96T
ANNA-2/Ri 人抗神经元核抗体2型/抗Ri抗体 规格: 48T/96T
ANNA-1/Hu 人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体 规格: 48T/96T
NB-Ab 人抗神经母细胞瘤抗体 规格: 48T/96T
GM1 人抗抗体 规格: 48T/96T
BPI-Ab 人抗杀菌通透性增高蛋白抗体 规格: 48T/96T
anti-parotid duct Ab 人抗腮腺管抗体 规格: 48T/96T
anti-parotid duct Ab 人抗腮腺管抗体 规格: 48T/96T
anti-cartilage-Ab 人抗软骨抗体 规格: 48T/96T
anti-cartilage-Ab 人抗软骨抗体 规格: 48T/96T
AhCGAb 人抗抗体 规格: 48T/96T
AhCGAb 人抗抗体 规格: 48T/96T
HIV 人抗人类免疫缺陷病毒抗体 规格: 48T/96T
HIV 人抗人类免疫缺陷病毒抗体 规格: 48T/96T
anti-chromosome Ab 人抗染色体抗体 规格: 48T/96T
anti-chromosome Ab 人抗染色体抗体 规格: 48T/96T
NMY51 感受态细胞100ul*10 PCA-1/Yo 人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体 规格: 48T/96T
ASMA 人抗平滑肌抗体 规格: 48T/96T
ASA 人抗皮肤抗体 规格: 48T/96T