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Y190 感受态细胞100ul*10以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
Y190 感受态细胞100ul*104. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml,过高的浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
Y190 感受态细胞100ul*105. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
CORT 人皮质酮/肾上腺酮 规格: 48T/96T
Cortisol 人 规格: 48T/96T
CLA 人皮肤淋巴细胞相关抗原 规格: 48T/96T
SRF/IF 人皮肤反应因子/炎性因子 规格: 48T/96T
DPT 人皮肤蛋白 规格: 48T/96T
CTACK/CCL27 人皮肤T细胞虏获趋化因子 规格: 48T/96T
FSA 人胚胎性硫糖蛋白抗原 规格: 48T/96T
CIAP 人牛小肠碱性磷酸酶 规格: 48T/96T
FⅫ 人Ⅻ 规格: 48T/96T
FⅩⅢ 人ⅩⅢ 规格: 48T/96T
FⅩ 人Ⅹ 规格: 48T/96T
FⅨ 人Ⅸ 规格: 48T/96T
Ⅷ-Ag 人Ⅷ相关抗原 规格: 48T/96T
FⅢ 人Ⅲ 规格: 48T/96T
FⅡ 人Ⅱ 规格: 48T/96T
F1+2 人原片段F1+2 规格: 48T/96T
T-TM 人血栓调节蛋白复合物 规格: 48T/96T
TR 人受体 规格: 48T/96T
TAT 人抗复合物 规格: 48T/96T
Gelsolin 人凝溶胶蛋白 规格: 48T/96T
CLU 人凝聚素 规格: 48T/96T
gelson 人凝胶原蛋白 规格: 48T/96T
UFC 人尿游离 规格: 48T/96T
ALB 人尿微量白蛋白 规格: 48T/96T
UreC 人尿素酶相关蛋白C 规格: 48T/96T
PLAUR/uPAR 人型纤溶酶原激活物受体 规格: 48T/96T
uPA/PLAU 人型纤溶酶原激活物 规格: 48T/96T
uPA/PLAU 人型纤溶酶原激活物 规格: 48T/96T
uPA 人型纤溶酶原激活物 规格: 48T/96T
UK 人 规格: 48T/96T
UP 人尿蛋白 规格: 48T/96T
GDI 人鸟苷酸解离抑制因子 规格: 48T/96T
GEF 人鸟苷酸交换因子 规格: 48T/96T
ODC 人脱羧酶 规格: 48T/96T
ODC 人脱羧酶 规格: 48T/96T
OCT 人氨基甲酰转移酶 规格: 48T/96T
Y190 感受态细胞100ul*10 FAK 人黏着斑激酶 规格: 48T/96T
MAdCAM-1 人黏膜地址素细胞黏附分子 规格: 48T/96T
BDNF 人脑源性神经营养因子 规格: 48T/96T
BNP 人脑钠素/脑钠尿肽 规格: 48T/96T