产品应用：

免疫化学法检测细胞和组织缺氧情况，包括免疫荧光（IF），免疫过氧化物酶，WB或流式细胞分析（FC）；

试剂盒组分：

编号 组分名称 货号（规格） 保存方法

HP1-100Kit HP1-200Kit HP1-1000Kit

1 Pimonidazole HCl 100mg 200mg 1000mg 室温或2-8℃避光

2 4.3.11.3 mouse MAb 1ml 1ml 1ml -20℃，避免反复冻融 

试剂盒组分详细描述：

Hypoxyprobe-1

Hypoxyprobe-1 是2-硝基咪唑的替代物，其化学名和*成分是Pimonidazole hydrochloride（Pimonidazole HCl），分子量为290.8，水溶性为400mM（=116 mg/ml），紫外吸收（324nm）的吸光系数为7020（0.9%生理盐水）。

Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化学稳定性。比如，固体形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光线下室温保存2年，UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。溶于0.9%生理盐水的Hypoxyprobe-1，浓度100g/L置于2-8℃保存4.5年，UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。

作用机理：缺氧细胞中Pimonidazole被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团（thiol groups）形成稳定的加合物。Mab1抗体结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。

MAb1抗体

MAb1是小鼠IgG1单克隆抗体（克隆4.3.11.3），为杂交瘤细胞克隆4.3.11.3表达液过滤除菌后得到的上清液，含60μg/ml MAb1和0.15%叠氮钠。

感兴趣组织可用免疫组化检测（IHC），冰冻切片或者福尔马林固定的石蜡包埋切片；也可组织降解后用流式分析法检测；或用WB检测。典型情况下，MAb1抗体经1:50稀释后，取100μl到组织切片上。然后加合适的二抗方法来检测Pimonidazole加合物。

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