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PfAgo Endonuclease PfAgo核酸内切酶
¥2000免疫组化笔(Pap Pen笔) 实验室耗材
¥800磷酸化蛋白电泳试剂Phos-tag
¥3999Hypoxyprobe CY 7 Kit
¥7200Hypoxyprobe™ RED PE Kit 缺氧探针试剂盒
¥5280Hypoxyprobe RedAPC Kit
¥5360Hypoxyprobe Red549 Kit缺氧探针检测试剂盒
¥5104Hypoxyprobe Green Kit - Mouse FITC-Mab
¥4880Hypoxyprobe-F6 Kit - Rabbit antisera to CCI-103F a
¥5520Hypoxyprobe Omni Kit - Affinity purified rabbit an
¥5280Hypoxyprobe Plus Kit - Mouse FITC-MAb plus rabbit
¥5280Hypoxyprobe-1 Kit - Mouse MAb
¥4748OscpSRP43参与水稻叶绿体正常发育以及光合作用,OscpSRP43组成性表达,包括根、茎、叶、叶鞘以及穗,在叶片表达量最高。
针对OscpSRP43蛋白PhytoAB研发了PHY4352S。PHY4352S的免疫原为Os03g0131900的一段多肽序列,确定反应物种: Oryza sativa。WB结果如下图:
首先研究了cpSRP43突变株(chaos)中的TBS蛋白的含量,发现叶绿素合成限速酶-谷氨酰-tRNA 还原酶 (GluTR),镁离子螯合酶 (MgCh) 的催化亚基CHLH以及MgCh的激活子GUN4的含量显著下降,表明cpSRP43能够保护GluTR, CHLH 和GUN4的稳定性。生物荧光互补实验(BiFC)和体外Pull down实验证实了它们之间的相互作用。为了弄清楚cpSRP43是如何保护TBS蛋白的稳定性,研究人员进行了体外的蛋白散射分析(Scattering assay),发现cpSRP43能保护TBS蛋白避免在高温下形成聚集失活。体内实验,研究人员将野生型和chaos在高温(42 °C)下处理后检测cpSRP43对于TBS的热保护作用,发现缺失了cpSRP43的突变体中TBS蛋白稳定性下降,叶绿素的合成相比野生型下降明显,进一步证实了cpSRP43对于TBS蛋白的热保护作用。
叶绿体信号识别粒子 (cpSRP)由亚基 cpSRP43 和 cpSRP54 组成,之前已经知道cpSRP43和cpSRP54形成异源二聚体介导捕光天线蛋白(LHCP)在叶绿体内的运输和膜整合并且cpSRP54能够促进cpSRP43去保护LHCP免于聚集失活【4】。在本研究中,研究人员在蛋白散射分析中添加cpSRP54,惊奇地发现cpSRP43对于TBS蛋白的热保护作用被大大削弱,表明与对LHCP的情形相反, cpSRP54抑制cpSRP43对TBS蛋白的保护作用。为了弄清楚cpSRP54是如何在促进/抑制的两种角色中转换的,研究人员研究了温度对于cpSRP43-cpSRP54互作的影响,发现高温削弱了 cpSRP54 与 cpSRP43 的相互作用,从而释放cpSRP43与TBS蛋白互作并保护TBS蛋白。
上样蛋白分别为5 μL水稻叶绿体蛋白(Os-Chl);
一抗稀释比例: 1: 5000.