HP6-100KitHypoxyprobe Green Kit - Mouse FITC-Mab
其他品牌 品牌
生产厂家厂商性质
南京市所在地
编号 | 组分名称 | 货号(规格) | 保存方法 | ||
HP6-100Kit | HP6-200Kit | HP6-1000Kit | |||
1 | Pimonidazole HCl | 100mg | 200mg | 1000mg | 室温或2-8℃避光 |
2 | 4.3.11.3 mouse FITC-MAb | 200μl | 200μl | 2×200μl | 2-8℃避光,避免反复冻融 |
1、Hypoxyprobe-1
Hypoxyprobe-1是2-硝基咪唑的替代物,其化学名和成分是Pimonidazole hydrochloride(Pimonidazole HCl),分子量为290.8,水溶性为400mM(=116 mg/ml),紫外吸收(324nm)的吸光系数为7020(0.9%生理盐水)。
Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化学稳定性。比如,固体形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光线下室温保存2年,UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。溶于0.9%生理盐水的Hypoxyprobe-1,浓度100g/L置于2-8℃保存4.5年,UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。
作用机理:缺氧细胞中Pimonidazole被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团(thiol groups)形成稳定的加合物。Mab1抗体结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。
2、FITC-MAb1抗体
FITC-MAb1是荧光素偶联的小鼠IgG1单克隆抗体(克隆4.3.11.3),浓度为0.5mg/ml(in PBS)。
感兴趣组织可用免疫组化检测(IHC),冰冻切片或者福尔马林固定的石蜡包埋切片;也可组织降解后用流式分析法检测;
3、anti-FITC HRP抗体
本抗体为偶联到HRP的兔IgG多克隆抗体。用于检测福尔马林石蜡包埋的小鼠肿瘤组织,不仅有强荧光信号,且背景极其低。
使用指南:
1、Animal Studies 动物研究
研究正常或肿瘤组织缺氧首先通过静脉注射(intravenous infusion)、腹腔注射(intraperitoneal injection)或口服(oral ingestion)法给Hypoxyprobe-1溶液,剂量为60mg/kg体重。比如,25g小鼠的探针用量为1.5mg/只小鼠。(高达400mg/kg的剂量用于小鼠无可见毒性或引起组织缺氧变化,但60mg/kg以*给予良好的染色结果)。
给药后,Hypoxyprobe-1分布到包括大脑的所有组织,且仅仅在氧浓度≤14μM(相当于pO2=10mm Hg,37℃)的细胞内与蛋白质巯基形成加合物。除了肿瘤之外,正常组织如肝脏、肾脏和皮肤含pO2等于或低于10mm Hg的细胞,也会结合Hypoxyprobe-1。
2、 Tissue cultures 组织培养
通常情况下,细胞悬液置于含100-200μM Hypoxyprobe-1的缺氧环境中孵育1-2h。之后细胞离心涂片、固定、FTIC-MAb1和anti-FITC chromogenic secondary染色。
相关产品:
HP12-100Kit | Hypoxyprobe-PAb27 Kit | 5280 |
HP13-100Kit | Hypoxyprobe ATTO 594 Kit | 7680 |
HP14-100Kit | Hypoxyprobe CY 7 Kit | 7200 |