免疫荧光双标实验

免疫荧光双标实验

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伊莱博生物科技(上海)有限公司

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产品简介

免疫荧光双标实验是一种利用抗原抗体特异性结合原理,在同一张切片上同时标记两种抗原,从而实现定位、定性和半定量分析的实验方法。这种技术具有较高的空间分辨率,可以精确定位细胞内分子,揭示细胞内分子之间的相互作用和信号传递路径,为疾病发病机制的研究提供有力支持。

详细介绍

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位。

免疫荧光双标实验技术是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体)。在组织或细胞内形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受外来激发光的照射而发生明亮的荧光(黄绿色或橘红色),可以看见荧光所在的组织细胞,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。

免疫荧光双标实验有直接法和间接法两种。(1)直接法:将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。(2)间接法:如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体与抗原标本反应,使之形成抗原—抗体—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为抗体,其它步骤的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,同于血清球蛋白有种的特异性。



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