软琼脂克隆:克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状
实验步骤
1.获取样本，培养细胞，
2.调整细胞悬液密度为1x103个/ml细胞。
3.制备底层琼脂，*溶化的5%琼脂和37*C左右预温的新鲜*培养液以1: 9比例在40^C均匀混合，加入培养皿(直
径60mm)中，每皿含0.5%琼脂培养基2ml,室温下琼脂*凝固。
4.制备上层琼脂,37C密度每皿含200个的细胞悬液1.5m移入小烧杯中，加入40C、5%琼脂等体积混匀，即成0.25%半固
体琼脂培养基。配好的半固体琼脂培养基立即加入铺有底层琼脂的培养皿中，室温下琼脂凝固。37C、5%CO2静置培养2-
3周。
5.当培养皿中出现肉眼可见克隆时，终止培养，弃去培养液，PBS液小心浸洗2次，空气干燥。甲醇固定15分钟，弃甲醇后
空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟，流水缓慢洗去染液，空气干燥。

 实验周期及交付标准
1.实验周期: 1-2周
2.交付标准:克隆形成图片、计数结果、柱状图、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
细胞包克隆化其他方法
1.稀释铺板方法
2.饲养层克隆法
3.毛细管克隆法
4.荧光激活分选法