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使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | YellowHead Baculovirus(YBV)RTPCR |
货号 | XG-P2289 |
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
TBB培养基250g用于乳酪产品中梭菌的计数
CATC琼脂 CATC Agar 用于食品和饮料肠球菌的分离培养
MiddleBrook 7H11 琼脂 MiddleBrook 7H11 Agar 250 用于分枝杆菌的分离培养
麦芽汁琼脂培养基250g/瓶含3%麦芽浸粉,不含,用于霉菌和酵母菌的分离和培养incubationmedia麦芽汁琼脂培养基250g/瓶含3%麦芽浸粉,不含,用于霉菌和酵母菌的分离和培养
YeastExtractAgar猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISAKit 进口分装 20(S)-人参皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 63223-86-9 C36H62O9 ≥98% 询价
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit 进口分装 木兰脂素 Magnolin 31008-18-1 C23H28O7 ≥98% 询价
兔子坏死因子α(TNF-α)ELISAKit 进口分装 金丝桃苷 Hyperoside 482-36-0 C21H20O12 ≥98% 询价
醛缩酶(ALD)测试盒 进口分装 甘草次酸 Glycyrrhetinic Acid 471-53-4 C30H46O4 ≥98% 询价TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人细胞裂解液 (阳性对照)
内脏脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
beta-Amyloid(35-42) β淀粉样肽/Aβ42抗体 * 0.1ml
ER α 雌激素受体α抗体 * 0.1ml
CKLFSF2/CMTM2 趋化素样因子超家族成员2抗体 * 0.2ml
COX7A2 氧化酶VIIA亚型2抗体 * 0.1ml
CKLFSF2 isoform 1 趋化素样因子超家族成员2亚型1抗体 * 0.2ml
MAP65/ASE 1 拟南芥MAP65蛋白抗体 * 0.2ml
Streptavidin/SA protein 链酶亲和素抗体 * 0.1ml
human Serum IgA 人血清型免疫球蛋白A抗体 * 0.2ml
ETFA 电子转移黄素蛋白α抗体 * 0.2ml
γ-taxilin/LSR5 脂多糖相关反应蛋白5抗体 * 0.2ml
大鼠主动脉平滑肌细胞*培养基 100mL
293-L.P.人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293-L.P. MEM+10% FBS
IFNG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白
HKC(人胚肾上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 小肠结肠炎耶尔森氏菌
黄头杆状病毒PCR检测试剂盒缓冲蛋白胨水90ml/瓶
近平滑念珠菌ATCC22019冻干粉
金针菇
金耳、黄木耳
根霉属的菌
脆弱拟杆菌β-shēng huà shì jì容量:RT1克
1313-99-1绿色氧化镍Nickelous oxide
固红RCshēng huà shì jì容量:100克
异植物醇 Isophytol,≥97.0% 505-32-8 25ML 通用试剂
偶氮膦mN/2-(4--2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-硝基苯偶氮)-1,8-二羟基-3,6-二磺酸/CPA-mN 显色剂 1克 国产/进口ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人细胞裂解液 (阳性对照)
rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞
大鼠嗅鞘细胞*培养基 100mL
DH82狗肾恶性组织细胞增生症细胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS
IFNA5 Protein Human 重组人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 标签)
NCI-H2227(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。