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上海市所在地
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
产品名称:假结核耶尔森菌PCR检测试剂盒
英文名称:Yersinia pseudotuberculosisPCR
编号:XG-P2292
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
T250g用于霍乱弧菌的生长试验(SN标准)
K'smediumacidification
DNA酶琼脂 DNase Agar 100 用于核糖核酸酶检测
缓冲MUG琼脂2000ml/瓶用于滤膜法测定大肠杆菌incubationmedia缓冲MUG琼脂2000ml/瓶用于滤膜法测定大肠杆菌
血平皿(9cm) 10个/包 用于一般细菌的分离、培养和溶血试验人趋化素样因子超家族成员8(CKLFSF8)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 2444-46-4 Nonivamide C17H27NO3 293.4 Alkaloids >=98% 50mg
人结缔组织生长因子(CTGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 1352001-09-2 3Beta-acetoxy-eupha-7,25-dien-24(R)-ol C32H52O3 484.75 Triterpenoids >=98% 5mg
人STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 17334-58-6 Pelargonidin-3,5-O-diglucoside chloride C27H31O15Cl 631 Flavonoids > 95% 10mg
人肝配蛋白A受体3(EPHA3)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 531-59-9 7-Methoxycoumarin C10H8O3 176.2 Coumarins > 98% 100mgPARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人间充质干细胞-骨髓总RNAHMSC-bm NA
家猫肺细胞;FCA-L1
HCCC-9810细胞,胆管细胞型肝癌细胞 系,HL细胞 小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32
RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
假结核耶尔森菌PCR检测试剂盒改良马丁琼脂培养基90mm
菊糖芽孢乳杆菌
德氏乳杆菌保加利亚亚种
宽鳞大孔菌
奇异翅孢壳
食油假单胞菌2'-DEOXY-D-RIBOSE2-脱氧-D-核糖超纯级白色至米白色至微黄色粉末COLDsigma
108-41-83-录, 98%3-Chlorotolue
D-GLUCOSE,ANxy7noUSD-葡萄糖,无水美国药典级,ACS级,欧洲药典级,日本药典级白色精细粉末RTsigma
异烟酰盐酸盐 Isonicotinoyl chloride hydrochloride,... 39178-35-3 5G 通用试剂
利卡灵-B (-)-Li B (≥98%,HPLC) 51020-87-2 20MG 标准品CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚肾细胞;293 Cells, low passage
人支持细胞*培养基 100mL
EL4细胞,小鼠淋巴瘤细胞 3T3-Swiss albino(胚胎成纤维细胞) 人肺转化细胞;AE1201
CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 标签)
SCaBER(人膀胱鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照)