UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒微量法
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具体成交价以合同协议为准
2023-12-24 07:02:30
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上海帛科生物技术有限公司

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产品简介

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒微量法公司正在出售的产品:快速硫化氢试验琼脂进口、国产H2S Test Medium250克弯曲杆菌的硫化氢试验脱氧核糖核酸甲基绿琼脂基础进口、国产Dnase Agar Base With Methyl Green100克用于细菌的DNA水解试验波尔顿肉汤进口、国产Bolton Selective Enrichment Broth250克弯曲杆菌的选择性增菌培养弯

详细介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6986

产品分类:糖原系列
商品介绍:

测定意义:

UDPG焦磷酸化酶是生物体糖原合成过程中的关键酶。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖(UDPG)。

测定原理

UGP可逆催化反应生成1磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP转化为NADPH340nm的吸光值增加速率反映了UGP活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

250U Tth DNA聚合 Tth DNA Polymerase -20℃保存

250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X   PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X   常温保存

20次 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒(含高效转化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常温

50T 水貂肠炎病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

RNS  250g

1瓶 Tca-8113细胞株 Tca-8113 低温运输和保存

煌绿琼脂 Brilliant Green Agar 250g

1mL 纤连蛋白 ( 人血 ) Fibronectin(FN) From Human Plasma     -20℃保存

50T 副流感病毒Ⅰ型PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

300µL 兔抗鸡IgY,辣根过氧化物标记 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate -20℃保存

2 ug Super PiggyBac Transposase Super PiggyBac Transposase 低温运输,-20℃保存

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒微量法DSCC1  DSCC1蛋白抗体 规格: 0.2mlPhospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)  磷酸化小板源性生因子受体-B抗体 规格: 0.1ml

Phospho-HER2 (Tyr686)  磷酸化HER2受体抗体 规格: 0.1mlInhibin beta A/Activin A  抑制素βA抗体 Inhibin βA 规格: 0.2ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG  小鼠抗豚鼠IgG 规格: 1mgRabbit Anti-Biotin/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1ml

BFSP2/Phakinin  晶状体蛋白2抗体 规格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser296)  磷酸化原基因c-Raf抗体 规格: 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgG/FITC  FITC标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.3mlHPV16-E6  人类状瘤毒16抗体 规格: 0.1ml

Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)  磷酸化叉蛋白家族抗体 规格: 0.1mlH9N1 Neuraminidase  A型毒H9N1神经型抗体 规格: 0.2ml

ATRN  吸引素抗体 规格: 0.2mlMATH1  肠道分化干细胞MATH-1蛋白抗体 规格: 0.1ml

Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939)  磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 规格: 0.1mlEukaryotic aspartyl protease  天冬蛋白家族蛋白抗体 规格: 1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)  磷酸化雌激素受体α抗体 规格: 0.1mlACE1/CD143  管紧张素转换ACE1抗体 0.1ml

ZNF379/ZDHHC9  锌指蛋白379抗体 规格: 0.2mlCRISP3  富含半胱分泌蛋白3抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgG 规格: 0.1ml

SLC44A1/CD92  溶质转运蛋白家族44成员1抗体 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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